Zoonens及其同事首次描述了环辛基丙烯酰胺(COA)/丙烯酸(AA)共聚物用于稳定膜蛋白(1),(2)。这些共聚物可以在缺乏表面活性剂的情况下,将膜蛋白从天然膜中提取到胞双层的一个区域,并形成类似盘状或纳米盘的粒子。基于HEPES的Amphipol产品含有共聚物和50 mM HEPES缓冲液,调整至pH 7.5,因此只需加入双蒸馏水即可直接应用。所选的pH值非常有效地用于蛋白质溶解。Cube Biotech的UltrasoluteTM Amphipol 18是环辛基丙烯酰胺和丙烯酸的高纯度共聚物,分子量(Mw)约为7,300。溶解后,共聚物的浓度为1.0至5.0%,当加入到膜蛋白中时,会导致高浓度。共聚物在与脂质接触的表面具有疏水性,外部表面具有亲水性。这种结构使得纳米盘在水溶液中高度溶解,并允许在缺乏表面活性剂的情况下溶解膜蛋白。该产品可与磷脂一起使用,如二十二碳二酰基甘油磷酰胆碱(DMPC)或棕榈酰亚油酰磷脂酰胆碱(POPC),结合十二烷基硫酸钠。
作为Cube Biotech在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐Ultrasolute Amphipol 18 HEPES。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
Ultrasolute Amphipol 18 HEPES | CBB-18321 | 查看 |
共聚物溶液再构成
UltrasoluteTM Amphipol共聚物以冻干形式交付,原溶液含有50 mM HEPES,pH7.5。每个小分子含有50毫克或1克聚合物。每50毫克聚合物添加0.5毫升双蒸馏水将恢复原始溶液,共聚物浓度为10%。根据不同的应用方案需要,这种储备溶液可以进一步稀释。
技术细节
名称:环辛基/丙烯酸共聚物,钠盐,50 mM HEPES,pH 7.5
吸光度(280 nm,1%溶液):大于0.1
填充量:环辛基/丙烯酸比例50:50
溶解度:大于10%(H2O)
颜色:白色至浅黄色
气味:无味
pH值(溶解后):7.5 ± 0.3
运输和储存
运输温度:室温
冻干共聚物储存:-20°C,可保存数年
溶解共聚物储存:2-8°C,可保存数天
文献参考:
1. Ana?s Marconnet, Baptiste Michon, Christel Le Bon, Fabrice Giusti, Christophe Tribet, and Manuela Zoonens*; Solubilization and stzabilization of membrane proteins by cycloalkane-modified amphiphilic polymers,Biomacromolecules 2020, 21, 8, 3459–3467
2. Anna J. Higgins, Alex J. Flynn, Ana?s Marconnet, Laura J. Musgrove , Vincent L. G. Postis, Jonathan D. Lippiat ,Chun-wa Chung, Tom Ceska, Manuela Zoonens, Frank Sobott, and Stephen P. Muench, Cycloalkane-modifiedamphiphilic polymers provide direct extraction of membrane proteins for CryoEM analysis, CommunicationsBiology, volume 4, Article number: 1337, 2021
Cube Biotech 是一家专注于蛋白纯化产品的德国生产商,尤其擅长蛋白纯化及膜蛋白纯化。Cube Biotech 研发团队拥有近50年经验在膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究,为制药和生物技术行业以及学术环境提供这些经验。膜蛋白的结构分析仍是一个巨大的挑战,尤其是关于人源膜蛋白。德国 Cube Biotech 为研究和进步释放膜蛋白的力量,以团队所有科学专业知识支持制药和生物技术界。通过运用前沿科学技术,德国 Cube Biotech 提供的系列产品解决膜蛋白质纯化和稳定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白质亲和层析填料和蛋白质稳定化的高品质产品,产品的配套试剂包括去污剂、无细胞表达裂解物、纳米盘支架蛋白和膜蛋白结晶板。
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