将苯乙烯/丙烯酸共聚物用于稳定膜蛋白的方法最初由Smith及其同事(1)描述。这些共聚物可以在没有清洁剂的情况下,将膜蛋白与天然膜结合,包裹在脂质双层的一个区域周围,形成类似盘状或纳米盘的结构。基于HEPES的AASTY产品含有共聚物和50 mM HEPES缓冲液,调节至pH 7.5,因此只需添加双蒸馏水即可直接应用。所选的pH值非常有效用于蛋白质的溶解。来自Cube Biotech的AASTY 11-50是一种高纯度的苯乙烯和丙烯酸共聚物,分子量(Mw)为5.500。在溶解后,共聚物的浓度在1.5%至6.0%之间,当添加到膜蛋白中时会导致高浓度。共聚物提供一个面向脂质的疏水表面,以及一个外部的亲水表面。这种设置使纳米盘在水溶液中高度溶解,并允许在没有清洁剂的情况下溶解膜蛋白。该产品可以与磷脂一起使用,如二十二碳二酰基甘油磷胆碱(DMPC)或棕榈酰油酰基磷脂酰胆碱(POPC),结合十二烷基磺酸钠。AASTY和膜蛋白的复合物可与许多生物物理学分析方法一起使用,如SDS-PAGE、SEC、Western Blot、UV/Vis光谱和许多色谱过程。共聚物溶液的重组Cube AASTY共聚物经过冻干处理,含有50 mM HEPES,pH 7.5的溶液。每份含50毫克聚合物或1克。每50毫克聚合物添加0.5毫升双蒸馏水,将恢复具有10%共聚物浓度的原始溶液。根据不同的应用协议,这种储备可以进一步稀释。
作为Cube Biotech在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐AASTY 11-50,10x50 mg。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
AASTY 11-50,10x50 mg | CBB-18265 | 查看 |
技术细节
名称:苯乙烯丙烯酸共聚物,钠盐,50 mM HEPES,pH 7.5
吸光度(280 nm,1%溶液):> 0.1
AA/STY比例:50:50
溶解性:> 10%(H2O)
缓冲液:HEPES
双价阳离子耐受性:6 mM
pH值(溶解后):7.5 ± 0.3
分子量:10,000 - 11,000克/摩尔
运输和储存
运输温度:常温
冻干共聚物储存:-20°C,可保存数年
溶解共聚物储存:2-8°C,可保存数天
对于从稀释溶液中纯化带有His标签的蛋白质,我们建议使用PureCube Ni-NTAMagBeads。对于GST标记的、Rho1d4标记的或Strep?标记的蛋白质的亲和纯化,Cube Biotech提供专用琼脂糖树脂、磁珠和预装载的柱。
文献参考:
1. Anton A.A. Smith, Henriette E. Autzen, Bryan Faust, Joseph L. Mann, Benjamin W. Muir, Shaun Howard, AlmarPostma, Andrew J. Spakowitz, Yifan Cheng, and Eric A. Appel; Lipid Nanodiscs via Ordered Copolymers Chem 6,2782–2795, October 8, 2020.
2. M Timcenko, AAA Autzen, HE Autzen Characterization of divalent cation interactions with AASTY nativenanodiscs. Biorxiv, doi: https://doi.org/10.1101/2021.10.07.463511
Cube Biotech 是一家专注于蛋白纯化产品的德国生产商,尤其擅长蛋白纯化及膜蛋白纯化。Cube Biotech 研发团队拥有近50年经验在膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究,为制药和生物技术行业以及学术环境提供这些经验。膜蛋白的结构分析仍是一个巨大的挑战,尤其是关于人源膜蛋白。德国 Cube Biotech 为研究和进步释放膜蛋白的力量,以团队所有科学专业知识支持制药和生物技术界。通过运用前沿科学技术,德国 Cube Biotech 提供的系列产品解决膜蛋白质纯化和稳定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白质亲和层析填料和蛋白质稳定化的高品质产品,产品的配套试剂包括去污剂、无细胞表达裂解物、纳米盘支架蛋白和膜蛋白结晶板。
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