使用苯乙烯/马来酸共聚物稳定膜蛋白的方法首次由Knowles及其同事描述(1)。这些共聚物可以在无洗涤剂的情况下,通过包裹在脂质双分子层上形成类似圆盘或纳米盘的结构,将膜蛋白从天然膜中提取到双层片中。基于HEPES的SMALP产品包含共聚物和50 mM HEPES缓冲液,调整至pH 7.5,因此只需加入双蒸馏水即可直接应用。所选的pH值非常适合蛋白质溶解。Cube Biotech的SMALP 300是苯乙烯和马来酸的高度纯化共聚物(SMA),分子量(Mw)为10,000。共聚物在溶解后的浓度为1.5至6.0%,当加入膜蛋白时,会导致高浓度。共聚物为疏水表面朝向脂质,而在外部为亲水表面。这种设置使纳米盘在水溶液中高度溶解,并允许在无洗涤剂的情况下溶解膜蛋白。该产品可与磷脂一起使用,如二肉豆蔻基甘油磷酰胆碱(DMPC)或棕榈酰亚油酰磷脂酰胆碱(POPC),结合十二烷基硫酸钠。SMA和膜蛋白的复合物可与许多生物物理分析方法一起使用,例如SDS-PAGE、SEC、Western Blot、UV/Vis光谱和许多色谱过程。Cube SMA共聚物溶液的重组Cube SMA共聚物经过冻干处理,从含有50 mM HEPES,pH 7.5的溶液中提取。每个小分子含有50毫克蛋白质。加入0.5毫升双蒸馏水将恢复原始溶液,共聚物浓度为10%。根据不同的应用方案,此储备液可以进一步稀释。
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产品名称 | 货号 | 详情 |
SMALP 300 10x50 mg | CBB-18200 | 查看 |
技术细节
名称:苯乙烯马来酸共聚物钠盐/SMA/SMALP 300,50 mM HEPES,pH 7.5
吸光度(280 nm,1%溶液):> 0.3
分子量:10,000克/摩尔
S:MA比例:3:1
溶解度:>10%(H2O)
颜色:无色
气味:无味
pH(溶解后):7.5 ± 0.1
运输与储存
运输温度 环境温度
冻干共聚物 储存-20°C,可保存数年溶解共聚物储存2-8°C,可保存数天
文献参考:
1. Knowles, T. J., Finka, R., Smith, C., Lin, Y.-P., Dafforn, T., & Overduin, M. (2009). Membrane Proteins Solubilized Intact in LipidContaining Nanoparticles Bounded by Styrene Maleic Acid Copolymer. Journal of the American Chemical Society, 131(22),7484–7485. doi:10.1021/ja810046q .
2. Lee, S. C., Knowles, T. J., Postis, V. L. G., Jamshad, M., Parslow, R. A., Lin, Y., … Dafforn, T. R. (2016). A method for detergent-freeisolation of membrane proteins in their local lipid environment. Nature Protocols, 11(7), 1149–1162. doi:10.1038/nprot.2016.070
Cube Biotech 是一家专注于蛋白纯化产品的德国生产商,尤其擅长蛋白纯化及膜蛋白纯化。Cube Biotech 研发团队拥有近50年经验在膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究,为制药和生物技术行业以及学术环境提供这些经验。膜蛋白的结构分析仍是一个巨大的挑战,尤其是关于人源膜蛋白。德国 Cube Biotech 为研究和进步释放膜蛋白的力量,以团队所有科学专业知识支持制药和生物技术界。通过运用前沿科学技术,德国 Cube Biotech 提供的系列产品解决膜蛋白质纯化和稳定化研究。Cube Biotech可提供一系列用于蛋白质亲和层析填料和蛋白质稳定化的高品质产品,产品的配套试剂包括去污剂、无细胞表达裂解物、纳米盘支架蛋白和膜蛋白结晶板。
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