重组人LIGHT/肿瘤坏死因子超家族14,无动物源&无载体蛋白的表达和纯化方法研究

LIGHT，也称为TNFSF 14，是由多种免疫细胞如活化的T细胞和未成熟树突状细胞（DC）产生的TNF超家族的成员。LIGHT是一种29 kDa的II型跨膜蛋白，其作为淋巴毒素β受体（LTβR）和TNFSF信号受体（TNFRSF 14/HVEM）的配体。此外，当呈递抗CD 3抗体处理时，LIGHT可以放大T细胞中的NF-kB信号传导途径。此外，LIGHT可通过与TNFRS 13/HVEM相互作用刺激T细胞增殖和IFN表达。

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重组人LIGHT/肿瘤坏死因子超家族14,无动物源&无载体蛋白：

来源：大肠杆菌。

纯度：通过SDS-PAGE.Ni-NTA色谱测定>98%。

生物活性：通过其在IFN-γ存在下在HT-29细胞中诱导细胞毒性的能力来测量。该效应的ED50＜10 ng/mL

内毒素：LAL法每1g蛋白质<0.01EU。

氨基酸序列：MRLGEMVTRLPDGPAGSWEQLIQERRSHEVNPAAHLTGANSSLTGSGGPLLWETQLGLAFLRGLSYHDGALVVTKAGYYYIYSKVQLGGVGCPLGLASTITHGLYKRTPRYPEELELLVSQQSPCGRATSSSRVWWDSSFLGGVVHLEAGEKVVVRVLDERLVRLRDGTRSYFGAFMV，C末端带有多组氨酸标签

配方：从无菌过滤的1X PBS水溶液中冻干，含有0.1%sarkosyl，pH8.0

重组人LIGHT的SDS-PAGE分析

使用方法：

1、开盖前，建议3000-3500rpm离心5min。

2、推荐使用无菌水重悬冻干粉，溶液浓度不低于100μg/mL，不高于1mg/mL，并室温静置至少20min以充分溶解。勿涡旋剧烈振荡。

3、重悬后的溶液，2-8℃无菌保存不超过1周。

4、如需长期保存，推荐使用无菌的含载体蛋白（如0.1%BSA、 10% FBS 或5%HSA）的溶液进一步稀释 ( 不低于10ug/mL ) 后分装保存，-20℃至-80℃无菌保存3到6个月。无血清实验需求时，可更换为 5%海藻糖溶液作为载体。避免反复冻融。

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