快速内切酶DpnI可用于消化质粒、基因组和病毒DNA以及PCR产物

快速内切酶是一系列能够快速消化DNA的工程限制性内切酶。所有快速内切酶在通用酶中表现出优越的活性? 和CutOne? 颜色缓冲，并能消化DNAin5～15分钟。这使得限制性内切酶的任何组合在一个反应管中同时工作，并且消除了连续消化的需要。快速内切酶已通过多项严格的质量控制，可用于消化质粒、基因组和病毒DNA以及PCR产物。CutOne 颜色缓冲液包括密度试剂以及红色和黄色跟踪染料，允许直接将反应混合物装载在凝胶上。CutOne的红色染料? 颜色缓冲液在1%琼脂糖凝胶中以2.5 kb双链DNA片段迁移，黄色染料在1%琼脂糖凝胶中以10 bp双链DNA片段迁移。

艾美捷快速内切酶DpnI：

Cat #: C-BSM585

Size: 50 rxns

Storage: -20°C

快速内切酶DpnI组成：

推荐反应条件

1xCutOne“缓冲器；

37℃培养；

热灭活

在80℃下培养20分钟。

质量控制

功能测试

在CutOne“含有1μg pUC19 DNA和1μl FlyCut”Dpnl的缓冲液中，在37℃培养15分钟，20μl反应得到琼脂糖凝胶电泳测定的完全消化。

延长培养时间/Star活性测定

在含有1μg pUC19 DNA和1μul FlyCut Dpnl的CutOne“”缓冲液中，在37℃下培养3小时，20μl的反应会导致DNA模式无可检测的核酸酶降解，如琼脂糖凝胶电泳所确定。较长的培养时间可能会导致star活性。

结扎和复发

用FlyCut’Dpnl在37°C下进行10倍酶切后，95%以上的DNA片段可与T4 DNA Ligaseat 22℃连接，经琼脂糖凝胶电泳检测，95%以上的DNA片段可与FlyCut’Dpnl连接。

在推荐的反应条件下，该酶能在5～15min内消化单位底物，最适反应温度为37℃。

当底物DNA被PCG甲基化酶甲基化时，这种限制性内切酶的切割可能受阻或受损。

当底物DNA被COBI甲基化酶甲基化时，这种限制性内切酶的切割可能受阻或受损。

80°C孵育20 min可使酶失活，3 h孵育不显示star活性，但长时间孵育可使star活性升高。