快速内切酶DpnII，专为快速酶切而设计

快速内切酶DpnII专为快速酶切而设计.5-15分钟即可完全酶切,让DNA酶切变得简单。组分：FlyCut? DpnII，10× CutOne? Buffer，10× CutOne? Color Buffer，保存建议-20℃

艾美捷快速内切酶DpnII：

Cat #: C-BSM533

Size: 50 rxns

Storage: -20°C

快速内切酶DpnII使用方法：

1.快速DNA消化方案

①将以下反应组分按所示顺序在冰上混合：

a. 对于纯化的PCR产物。如果PCR产物未纯化，则应将10倍CutOne“”缓冲液的量减少到2μl，以减少未纯化PCR产物中的剩余金属离子。如果用于克隆，我们建议在消化前纯化PCR产物，因为一些DNA聚合酶的核酸外切酶活性可能会改变切割DNA的末端。

②轻轻混合并向下旋转；

③ 在37°C下培养15分钟（质粒DNA）或15～30分钟（PCR产物）或30～60分钟（基因组

DNA）；

④ 可选：80°C加热20分钟灭活酶；

⑤如果在反应中使用CutOne“”颜色缓冲液，则将反应混合物的等分试样直接加载在凝胶上。

2.DNA的双重和多重消化

① 使用每种酶1μl，并适当扩大反应条件；

② 反应混合物中酶的总体积不应超过总反应体积的1/10；③如果酶需要不同的反应温度，从需要较低温度的酶开始，然后加入第二种酶并在较高温度下孵育。

3.扩大质粒DNA消化反应

在推荐的反应条件下，该酶可在5~15分钟内消化单位底物。酶的极适反应温度为37°C。

当底物DNA被DAM甲基化酶甲基化时，这种限制性酶的切割可能被阻断或受损。

当底物DNA被EcoBI甲基化酶甲基化时，这种限制性酶的切割可能被阻断或受损。

该酶可以在80°C下孵育20分钟进行热灭活。孵育3小时不会显示星形活性，但孵育时间较长可能会导致星形活性。

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