快速内切酶ClaI：能够在5~15分钟内消化DNA

快速内切酶ClaI是一系列能够快速消化DNA的工程限制性酶。所有快速内切酶ClaI在通用CutOne中显示出优异的活性? 和CutOne? 彩色缓冲液，能够在5~15分钟内消化DNA。这使得任何限制性酶的组合都能在一个反应管中同时工作，并消除了连续消化的需要。快速内切酶ClaI已通过多项严格的质量控制，可用于消化质粒、基因组和病毒DNA以及PCR产物。CutOne? Color Buffer包括密度试剂以及红色和黄色跟踪染料，可以将反应混合物直接装载在凝胶上。CutOne的红色染料? 彩色缓冲液在1%琼脂糖凝胶中与2.5kb双链DNA片段一起迁移，黄色染料在1%琼脂凝胶中与10bp双链DNA碎片一起迁移。

艾美捷快速内切酶ClaI：

Cat #: C-BSM532

Size: 50 rxns

Storage: -20°C

快速内切酶ClaI组成：

推荐反应条件：

1xCutOne“缓冲液；在37°C下培养；

热灭活

在80°C下培养20分钟。

质量控制：

功能测试

在含有1μgλDNA（Dam）和1μl FlyCut“”Clal的CutOne“”缓冲液中，在37℃下孵育15分钟，反应20μl，琼脂糖凝胶电泳测定完全消化。

长时间培养/星形活性测定

在含有1μgλDNA（Dam）和1μl FlyCut“”Clal的CutOne“”缓冲液中，在37℃下孵育3小时，反应20μl，通过琼脂糖凝胶电泳测定，结果是DNA模式没有可检测的核酸酶降解。较长的孵育时间可能导致星形活性。

结扎和清算

在37°C下用FlyCut“Clal消化10倍后，在22℃下，>95%的DNA片段可以与T4 DNA连接酶连接。在这些连接的片段中，通过琼脂糖凝胶电泳测定，>95%可以用FlyCut”“Clal重新切割。

非特异性核酸内切酶活性

在含有1μg超螺旋质粒和1μl FlyCut“”Clal的CutOne“”缓冲液中，在37℃下孵育4小时，反应20μl，通过琼脂糖凝胶电泳测定，转化为刻痕或线性形式的转化率<10%。

蓝白筛选法：

1μl FlyCut酶切lacZα基因载体? ClaI。将酶解产物连接并转化为大肠杆菌感受态细胞。在含有X-Gal、IPTG和适当抗生素的Luria Bertani培养板上，成功连接的β-半乳糖苷酶基因可以表达并产生蓝色菌落，而中断基因（即降解的DNA末端）产生白色菌落。飞剪? 限制性内切酶必须产生少于1%的白色菌落。