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链霉亲和素磁珠C-BETA2002操作方案

发布者:艾美捷科技    发布时间:2023-09-11     
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链亲和素磁珠,也称为SA磁珠,是2.8?m的超顺磁性颗粒,与高纯形式的链亲和素共价偶联。该珠可用于捕获生物素标记的底物,包括抗原、抗体和核酸。链霉亲和素磁珠可用于捕获生物素标记的底物,包括抗原、抗体和核酸。

 

艾美捷链霉亲和素磁珠

目录:C-BETA2002

名称:链霉亲和素磁珠-2.8μm

平均直径:2.8μm

浓度:10 mg/ml

共轭:链亲和素

无菌/内毒素:无菌,无内毒素

蛋白质浓度:0.6 mg/10 mg珠子

尺寸:2mL/10mL/100mL

特异性:生物素化配体

缓冲液:1xPBS,pH 7.4,0.1%BSA,2mM EDTA

储存温度:2℃至8℃

保质期:2年

 

链霉亲和素磁珠协议:

1.捕获生物素化核酸

1.1为了确保均匀性,在使用前,用20秒的轻柔涡流将珠子充分混合。将100μL链霉亲和素磁珠加入1.5 mL微量离心管中。将试管放入磁性支架中,收集珠子。取出并丢弃上清液。

注:建议生物素化分子和磁珠之间使用1:1或2:1的比例,以实现磁珠结合的饱和。生物矿化分子的量需要根据实验条件进行优化。

1.2向试管中加入1mL洗涤缓冲液A。将管子倒置几次或轻轻地涡旋混合。用磁性支架收集珠子,然后取出并丢弃上清液,重复洗涤两次。

注:当使用体积大于1 mL的磁珠时,建议向磁珠中添加等量的洗涤缓冲液a。

1.3加入用洗涤缓冲液A稀释的500μL生物素化核酸(以达到2mg/mL的珠浓度),通过振荡充分混合,并在室温下在摇床上孵育30分钟或在4℃下孵育2小时。

1.4用磁性支架收集珠子,并将上清液移到新的试管中。

1.5重复“步骤1.2”两次,清洗磁珠。

1.6根据后续实验的要求,加入合适的低盐缓冲液,使磁珠重新悬浮。生物素化核酸的捕获步骤现已完成。磁珠可以用于后续的实验操作。

2.捕获生物素化抗体/蛋白质

2.1为了确保均匀性,在使用前,用20秒的轻柔涡流将珠子充分混合。将100μL链霉亲和素磁珠加入1.5 mL微量离心管中。将试管放入磁性支架中,收集珠子。取出并丢弃上清液。

注:建议生物素化分子和磁珠之间使用1:1或2:1的比例,以实现磁珠结合的饱和。生物矿化分子的量需要根据实验条件进行优化。

2.2向试管中加入1mL洗涤缓冲液B。将管子倒置几次或轻轻地涡旋混合。用磁性支架收集珠子,然后取出并丢弃上清液,重复第三次洗涤。

注:当使用体积大于1毫升的磁珠时,建议在磁珠中加入等量的洗涤缓冲液B。

2.3加入用洗涤缓冲液B稀释的500μL生物素化抗体/蛋白质(以达到1mg/mL的珠浓度),通过摇动充分混合,并在室温下在摇动器上孵育1小时。

2.4用磁性支架收集珠子,并将上清液移到新的试管中。

2.5第五次重复“步骤2.2”,清洗磁珠。

2.6根据后续实验的要求,加入合适的低盐缓冲液,使磁珠重新悬浮。生物素化抗体/蛋白质的捕获现已完成。磁珠可以用于后续的实验操作。

 

洗涤缓冲液:

链霉亲和素磁珠

 

注:

●将珠粒的pH值保持在6-8之间,避免冷冻和离心。

●避免将磁珠长时间暴露在磁场中,以防止磁珠聚集,从而降低结合活性。

●为了zui大限度地减少磁珠的损失,磁分离时间应不少于1分钟。

●在制备生物素化样品的过程中,使用脱盐柱去除游离生物素。

●转移磁珠时,应通过摇动确保彻底再悬浮,并避免操作过程中出现气泡

本品仅供研究使用。


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