Bovine lgA ELISA--高效测量牛生物样品中的IgA

Bovine lgA ELISA试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于测量牛生物样品中的IgA。如果ELISA在预期用途之外使用，用户可能需要对所述用途进行优化。

仅用于研究。非诊断用途。仅限体外使用。

当按照包装内说明书中的信息完全理解并遵循实验程序，以及遵守良好的实验室操作规范时，将获得可靠和可重复的结果。可能影响实验性能的因素包括仪器功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量、试剂和样品移液的准确性、洗涤技术、孵化时间和温度。不要将不同批次或来源的试剂混合或替换使用。

艾美捷Bovine lgA ELISA试剂盒（E-10A）组件：

试剂盒及其组件的有效期标注在盒标签上。如果按照本试剂盒的协议插入说明进行存储和使用，所有组件都应保持稳定直至有效期。

Bovine lgA ELISA样本收集和处理：

所有血液成分和生物材料应被视为潜在的危险物质进行处理。在处理和处置时遵循通用预防措施。如果血液样本出现凝固、明显溶血、脂血，或者样本的完整性受到怀疑，请做记录并谨慎解释结果。

下面列出的样本收集和储存条件旨在作为一般指南。样本的稳定性尚未评估。

血清样本：应通过静脉穿刺采集血液。血液凝固后，应通过离心分离血清。取出血清后立即检测，或分装并储存于-80°C（Z好）或-20°C。避免反复冻融。

血浆样本：Z应将血液收集到含有抗凝剂的容器中，然后进行离心。立即检测或分装并储存于-80°C（好）或-20°C。避免反复冻融。

尿液样本：使用无菌或清洁的尿液收集器收集中段尿液。离心以去除细胞碎片。立即检测或分装并储存于-80°C（Z好）或-20°C。避免反复冻融。

已知干扰物质：高于0.1%浓度的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

Bovine lgA ELISA检测程序：

1. 所有样本和标准品都应以双份进行检测。

2. 应尽快将标准品和待测样本（s）装入ELISA孔中，以避免吸光度（OD）读数的偏移。使用多通道移液管可以减少这种情况的发生。将以下标准品和样本以双份移液至孔中：

标准品0（0.0 ng/mL）双份

标准品1（6.25 ng/mL）双份

标准品2（12.50 ng/mL）双份

标准品3（25 ng/mL）双份

标准品4（50 ng/mL）双份

标准品5（100 ng/mL）双份

标准品6（200 ng/mL）双份

标准品7（400 ng/mL）双份

3. 将100 μL的样本（双份）移液至预先指定的孔中。

4. 将微孔板在室温下孵育六十（60 ± 2）分钟。孵育期间保持板盖覆盖并保持水平。

5. 孵育后，吸去孔中的内容物。

6. 用适当稀释的洗涤液完全填充每个孔，然后吸去。重复三次，总共进行四次洗涤。如果手动洗涤：用洗涤缓冲液完全填充孔，然后将板倒置，将内容物倒入或摇晃进废液容器中。接着用力敲击孔以吸收纸上去除残留的缓冲液。重复三次，总共进行四次洗涤。

7. 将100 μL适当稀释的酶-抗体结合物移液至每个孔中。在室温下暗处孵育二十（20 ± 2）分钟。孵育期间保持板盖覆盖并保持水平。

8. 如步骤5/6所述洗涤并吸干孔中的内容物。

9. 将100 μL的TMB底物溶液移液至每个孔中。

10. 在暗处室温下精确孵育十分钟（10）。

11. 十分钟后，向每个孔中添加100 μL的终止溶液。

12. 在30分钟内测定每个孔中内容物的吸光度（450 nm）。根据制造商的规格校准板式读取器。