生化试剂盒显然是用于生化检测的,但什么是生化检测呢?
生化检测,顾名思义,是指利用生物或化学方法对样品进行检测。测定指标通常为酶、糖、脂类、蛋白质及非蛋白氮、无机元素等生化指标,或机体功能指标。常见的生化试验可简单分为两类:酶活性试验和底物或产物试验。如根据指标的具体作用,可分为:氧化与抗氧化系列、谷胱甘肽系列、氨基酸代谢系列、脂质代谢系列、氮代谢系列、辅酶I系列、辅酶II系列、神经递质系列、维生素系列、糖代谢系列、离子系列、酯酶系列等。
在实际操作过程中,客户经常会遇到以下困难:
1. 生化试剂盒的不同检测方法有什么区别?
2. 生化试剂盒与酶联免疫吸附试验的差异?
3.生化检测样品怎么准备呢?
这里统一给您解答:
1. 一般生化试剂盒的检测方法分为以下三类:
①比色法是一种常用的生化检测方法。比色法是根据产生有色化合物的显色反应,通过比较或测量有色物质溶液的显色深度来确定待测组分的含量。
②分光光度法是吸收特定波长或一定波长范围内的光,对物质进行定性或定量分析的方法。
③荧光法:荧光法在生化和制药领域有着广泛的应用。人们可以通过化学反应将荧光化学基团附着在生物体的特定结构上,然后通过观察示踪基团发出的荧光来灵敏地检测这些生物大分子。
2. 生化实验与ELISA实验的区别如下:
名称 | 生化检测试剂盒 | ELISA试剂盒
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原理 | 化学反应 | 抗原抗体特异性
|
目标 | 酶,糖,离子,蛋白质,有机小分子 | 蛋白质,有机小分子 |
检测仪器 | 酶标仪,紫外可见分光光度计,全自动生化分析仪 | 酶标仪 |
检测方法 | 比色法 | 荧光法比色法 |
结果表示 | 浓度,酶活性 | 浓度
|
比较优势 | 检测范围广,操作简单,样品种类广 | 灵敏度高 |
3.那么如何进行生化样品的预处理呢?
①液体样品
血清:取新鲜血液,25℃静置30分钟,使血液凝固。4℃,2000×g离心15 min,取上层淡黄色澄清液为血清。血清放在冰上待测。若当天无法检测,可在-80℃下保存一个月。
血浆:取新鲜血液,加入装有抗凝血剂的试管中,倒置混合,在4℃700-1000×g下离心10分钟,取上部黄色透明液体作为血浆,不能吸收中间的白色干扰层(白细胞和血小板)。等离子体被放置在冰上进行测试。如不能当天检测,可在-80℃下保存一个月。
尿液:收集新鲜尿液,在10000×g下4℃离心15 min,取上清冰测。若不能当天测量,可在-80℃下保存一个月。
②待均质样品
细胞:将悬浮细胞离心,用匀浆培养基将细胞匀浆粉碎。用刮细胞法(未加胰酶和EDTA)刮掉贴壁细胞,用匀浆培养基粉碎。
组织:取滤纸干燥称量,放入匀浆容器中,按重量(g):体积(mL) =1:9,在2-8℃下加入匀浆介质,匀浆后,4℃离心,10000×g离心10 min,取上清冰置待测,当日未检出,-80℃保存1个月;
微生物:用PBS (0.01M, pH 7.4)洗涤细菌沉淀物2-3次,先匀浆或研磨(有匀浆机则匀浆,无匀浆机则研磨),最后超声(真菌有细胞壁)。
细胞生化代谢研究技术仍有很大的发展空间,未来将应用到更多的实验领域,在生物产业的发展中具有举足轻重的地位,正不断得到越来越多生物学家的关注。
生化试剂盒推荐举例:
英文名称 | 中文名称 | 货号 |
EZMeta NADP/NADPH Colorimetric Assay Kit | EZMeta NADP/NADPH 含量检测试剂盒 | D-AKC1010 |
EZMeta Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase (G6PD) Colorimetric Activity Kit | EZMeta 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 (G6PD) 活性检测试剂盒 | D-AKC1011 |
EZMeta Creatine Kinase (CK) Colorimetric Activity Kit | EZMeta 肌酸激酶 (CK) 活性检测试剂盒 | D-AKC1012 |
EZMeta 6-Phosphogluconate Dehydrogenase (6PGD) Colorimetric Activity Kit | EZMeta 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 (6PGD) 活性检测试剂盒 | D-AKC1013 |
EZMeta Glucose-6-Phosphatase (G6P) Colorimetric Activity Kit | EZMeta 葡萄糖-6-磷酸酶 (G6P) 活性检测试剂盒 | D-AKC1014 |
EZMeta NAD/NADH Colorimetric Assay Kit | EZMeta 辅酶ⅠNAD (H) 含量检测试剂盒 | D-AKC1020 |
EZMeta NADH Oxidase (NOX) Colorimetric Activity Kit | EZMeta NADH氧化酶 (NOX) 活性检测试剂盒 | D-AKC1021 |
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