艾美捷抗原修复液：简化 HIER 优化、无毒不易燃

AntiFix? 通用抗原修复缓冲液专为福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 组织的热诱导表位修复 (HIER) 而设计。该缓冲液使用专有试剂催化 FFPE 组织中甲醛交联的逆转以恢复抗原反应性。

艾美捷抗原修复液#BTM-22030特征：

在中性 pH 条件下对多种靶标进行出色的抗原修复

简化 HIER 优化

通过使用酪胺扩增的荧光染色进行验证

无毒不易燃

用福尔马林（甲醛）固定组织可以保留组织形态，但甲醛引起的蛋白质交联可以修饰抗体结合位点或表位，因此免疫组织化学无法再检测到它们。传统上，通过使用蛋白酶处理或通过在低 pH 柠檬酸盐缓冲液或高 pH Tris 缓冲液中加热载玻片来恢复表位反应性。不同表位的最佳去掩蔽方法各不相同，需要针对不同靶标使用多种缓冲液。

AntiFix? 通用抗原修复缓冲液经过精心配制，可在中性 pH 条件下为各种靶标提供出色的热暴露，从而减少对缓冲液优化的需求。它已在使用 HRP 介导的酪胺信号放大的下一代荧光 CF? 染料对 FFPE 组织进行免疫荧光染色时得到验证。

抗原检索方案：

注：FFPE切片应烘焙在带正电的幻灯片上，以避免抗原回收过程中的组织损失

1.使用标准方案对FFPE切片进行除石蜡和再水合。

2.将幻灯片放入Coplin罐子或微波炉保险柜内的幻灯片架中

容器注意：微波会导致玻璃罐破裂。集装箱应在使用前测试耐热性。

3.准备1X AntiFix? 组合1的通用抗原回收缓冲液体积为10X的缓冲液，含9体积的dH2O并完全混合。

4.添加足够的1X AntiFix? 缓冲液以完全覆盖组织切片。通常，缓冲区被添加到磨砂幻灯片标签的级别。典型的5载玻片的Coplin玻璃罐的体积为40 mL，24载玻片的体积为200 mL架子染色皿。

5.加热缓冲区中的幻灯片。使用微波的两种加热方法（a）或下面描述多功能炊具（b）。微波是一种由来已久的技术HIER方法。一种带数字温度控制的厨房多功能锅（例如，Instant Pot?）是微波炉的一种方便的替代品。其他加热HIER常用的方法（如热水浴或商业倾斜室）。

注：用于纸巾加工的厨房设备应为专用设备用于研究实验室，根据您的要求贴上生物危害标签机构或地方法规。

a） 使用微波炉：保持载玻片容器未覆盖或松散覆盖以避免压力积聚。用微波炉加热幻灯片，直到缓冲液沸腾了。持续监控集装箱，继续煮10分钟，根据需要每30-60秒停止一次微波炉以防止缓冲液沸腾。煮沸10分钟后，让容器冷却至室温。

b） 使用多功能锅：放置随锅里的炊具。将滑动容器盖松以避免压力积聚。将滑动容器放在支架上，确保其固定安全地避免倾倒。把锅里装满水，使水位达到一半向上滑动容器。关上锅盖，在98°C下加热45分钟没有压力。热处理完成后，小心地移除将容器从锅中的热水中取出，冷却至室温温度

6.用dH2冲洗载玻片3次O完全移除缓冲区。

7.根据您的方案进行染色。

抗原修复液相关研究：

Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司，公司位于美国加利福尼亚的BAY AREA------中外知名首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化产品。其产品被广泛应用于细胞生 物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。Biotium公司专利产品众多，包括已经被广泛使用的实时PCR定量荧光染料EvaGreen、具有划时代意义的凝胶核酸染料Gel Red和GelGreen，以及最新推出的Cheetah Taq热启动酶和CF系列蛋白质标记染料等。 n目前，Biotium已将其许多专利技术授权给一些主要的国际生物技术公司，包括安捷伦、BD生物科学、Biolegend、BioRad、EMD Millipore、Illumina、PerkinElmer、Qiagen、Roche、Sartorius AG、Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等。