FcRn:IgG循环HMEC-1细胞池是一个表达Fcγ受体和转运蛋白(FCGRT)(NM_004107.5)和β-2-微球蛋白(B2M)(NM-004048.4)的HMEC-1电池池,在CMV启动子的控制下,由T2A自切割肽分离,通过慢病毒转导引入HMEC-1细胞。该细胞池旨在测量人IgG抗体的摄取和再循环(人FcRn不结合小鼠IgG)。
该细胞池已用纳武单抗、利妥昔单抗、曲妥珠单抗、抗PCSK9和抗IL-2Ra抗体进行了验证。
图1:FcRn:IgG-FcRn介导的再循环的IgG再循环HMEC-1细胞池机制。
细胞在低pH稀释缓冲液中与感兴趣的抗体(IgG)一起孵育,使FcRn与IgG结合。然后洗涤细胞,24小时后可以分析IgG循环。回收的抗体将存在于细胞培养基中。如果抗体保留在细胞内,可以通过裂解细胞并通过ELISA或其他感兴趣的方法测量细胞含量来进行检测。
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产品名称 | 货号 | 详情 |
FcRn: IgG 循环 HMEC-1 细胞池 | BPS-82163 | 查看 |
FcRn: IgG 循环 HMEC-1 细胞池:
宿主细胞系:HMEC-1,人类真皮微血管,内皮样细胞,贴壁细胞
物种:人类
供应形式:每瓶含有>1 x 10^6个细胞,1毫升的7.5% DMSO和92.5% FBS
需自备材料:细胞培养所需的培养基和补充剂
储存/稳定性:细胞在干冰中运输,收到后应立即解冻或储存在液氮中。不要使用-80°C的冰箱进行长期储存。如果细胞到达时没有在干冰中冷冻,请联系技术支持support@bpsbioscience.com。
培养基:为了获得最佳结果,强烈建议使用BPS Bioscience提供的经过验证和优化的培养基。其他培养基的制备或配方可能会导致性能不佳。
细胞培养所需的培养基:
解冻培养基18(BPS Bioscience #82205):MCDB131培养基,添加10% FBS,10 mM谷氨酰胺,1 ?g/ml氢化可的松,1%青霉素/链霉素。
准备FcRn:IgG循环HMEC-1细胞库培养基:解冻培养基18 + 10 ng/ml人类表皮生长因子(BPS Bioscience #90201-3)
生长培养基18A(BPS Bioscience #82206):MCDB131培养基,添加10% FBS,10 mM谷氨酰胺,1 ?g/ml氢化可的松,1%青霉素/链霉素和500 ng/ml普鲁霉素。
准备生长FcRn:IgG循环HMEC-1细胞库培养基:生长培养基18A + 10 ng/ml人类表皮生长因子(BPS Bioscience #90201-3)
功能性细胞测定所需的培养基
FcRn:IgG循环HMEC-1细胞库解冻培养基:解冻培养基18 + 10 ng/ml人类表皮生长因子(BPS Bioscience #90201-3)。
测定培养基8A(BPS Bioscience #82207):MCDB131培养基和1%青霉素/链霉素。
应用:
确定通过FcRn的抗体循环剖面。
筛选FcRn IgG循环的抑制剂。
运输温度:-80°C
FcRn: IgG 循环 HMEC-1 细胞池数据库:
文献参考:
Grevys A, et al., 2018 Nature Communications, 9: 621.
Swiercz R, et al., 2017 Oncotarget, 8(2): 3528–3541.
Weflen A, et al., 2013 Mol Biol Cell, 24(15): 2398–2405.
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