标准杆数稳态由标准杆数聚合酶(PARPs)和PARG(聚(ADP-核糖)糖水解酶)家族调节,以应对细胞应激条件。ADP核糖基化是将ADP核糖添加到蛋白质中,是主要参与DNA损伤反应(DDR)途径的蛋白质的可逆翻译后修饰。聚ADP核糖基化(称为PARylation)是ADP核糖直链或支链的加成。PARP和PARG活性与炎症、缺血、中风和癌症的细胞反应有关。PARP抑制剂已成功用于癌症治疗,当同源重组修复(HRR)已经存在缺陷时,会导致合成致死。PARG在癌症中过表达,并与肿瘤生长和存活相关。PARG活性的降低可以增强当前癌症疗法(如化疗和放疗)的效果,使选择性抑制剂抑制PARG成为癌症和免疫疗法中一种有前途的方法。对PARP和PARG的进一步研究将阐明PAR酸化蛋白的水平如何导致疾病,并可以调节以提供治疗益处。
LysA?通用PARylation检测试剂盒是一种基于夹心ELISA的试剂盒,旨在测量和量化细胞提取物中存在的总聚ADP核糖基化量。该试剂盒采用方便的96孔格式,包含所需的所有试剂,包括标准杆数标准,该标准允许建立定量测量的标准曲线。它含有足够的抗体、阻断缓冲液和检测试剂,以96孔板的形式测量细胞提取物中的PARylation水平。它还包括细胞裂解物作为测定性能的对照。
注:该测定仅适用于聚ADP核糖基化检测。该测定在100 pM至20 nM的PARylation范围内呈线性。
图1:LysA?通用PARylation检测工作流程图。
使用抗PAR抗体来涂覆96细胞板。来自细胞的裂解物被添加到包被的孔中,因此存在于细胞裂解物中的标准杆数(PARylated proteins)被抗体捕获。随后用抗PAR一级抗体和二级HRP-标记抗体孵育。添加化学发光的HRP底物提供了发光信号,其与细胞提取物中存在的标准杆数的量直接相关
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产品名称 | 货号 | 详情 |
LysA 通用PAR化检测试剂盒 | BPS-82123 | 查看 |
LysA 通用PAR化检测试剂盒:
同义词:PARP1, PARP2, PARG
试剂盒格式:化学发光
物种:人类
未提供但需要的材料:
改良的RIPA裂解缓冲液(中等强度)(BPS Bioscience #82126)
LysA?蛋白酶抑制剂鸡尾酒试剂盒(BPS Bioscience #82199)
ADP-核糖基化循环抑制剂混合物(BPS Bioscience #82130)
储存/稳定性
如果按照指示储存材料,这个试剂盒从收到日期起在6个月内将表现最佳。
应用:
在培养的细胞中定量总PAR水平。
在培养的细胞中筛选或确定PARP或PARG抑制剂的IC50。
在细胞模型中验证PARP或PARG抑制剂。
运输温度:-80°C
LysA 通用PAR化检测试剂盒产品数据库:
文献参考:
Marques M., et al., 2019 Oncogene 38 (12): 2177-2191.
James D. I., et al., 2016 ACS Chem Biol 11 (11): 3179-3190.
Drown B. S., et al., 2018 Cell Chem Bio 25 (12): 1562-1570.
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