GSK3α检测试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗GSK3Α检测试剂盒抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的GSK3Α检测试剂盒与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗GSK3Α检测试剂盒抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗GSK3Α检测试剂盒抗体与结合在包被抗体上的GSK3Α检测试剂盒结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,GSK3Α检测试剂盒浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中GSK3Α检测试剂盒的浓度。
艾美捷GSK3α检测试剂盒:
货号:BPS-79698
同义词:糖原合酶激酶3α,GSK-3α,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶GSK3A
检测试剂盒格式:发光型
物种:人类
未提供所需材料:
Kinase-Glo? Max检测试剂(Promega #V6071)
二硫苏糖醇(DTT,1 M;可选)
能够读取发光的微孔板阅读器
可调节的微量移液器和无菌吸头
30°C恒温箱
UniProt编号 :#P49840
储存/稳定性:按照推荐条件储存,可保存长达6个月。
运输温度:-80°C
禁忌:保持最终DMSO浓度低于1%
警告:避免多次冻融循环。
免责声明和限制:BPS Bioscience检测试剂盒是根据我们特定的协议,使用列出的组分进行验证的。任何对试剂盒组分或协议的偏差,如使用不同的蛋白质、细胞/组织裂解物或缓冲液(包括使用其他商业来源的相同组分),将使试剂盒的性能保证无效,并且不推荐使用。
科学类别:激酶
监管状态:仅限研究使用
GSK3α检测试剂盒格式:
*GSK3α的浓度具有批次特异性,将在含有酶的试管上显示。
文献参考:
McCubrey JA., et al. Oncotarget 5(10): 2881-2911 (2014)
GSK3α检测试剂盒灵敏度、检测范围、特异性和重复性:
灵敏度:最小可测:0.227ng/mL
检测范围:0.625-40ng/mL
特异性:可检测重组或天然的大鼠GSK3Α检测试剂盒,且与其它相关蛋白无交叉反应。
重复性:板内,板间变异系数均<10%。
GSK3Α检测试剂盒样品收集:
1. 血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2. 血浆:抗凝剂推荐使用EDTA-Na2,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
5. 其它生物样品:1000×g离心20分钟,取上清即可检测
6. 样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。
7. 样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融。
8. 如果您的样品中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。
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