BPS Bioscience CBL-B 驱动的 Tyro3 泛素化链内 TR-FRET 检测试剂盒

CBL-B驱动的Tyro3泛素化链内TR-FRET检测试剂盒是一种灵敏的高通量筛选（HTS）TR-FRETs检测试剂盒，旨在以均匀的384反应形式测量CBL-B E3连接酶活性。它利用铕标记的泛素（供体）和Cy5标记的泛碱（受体）来完成TR-FRET配对。由于TR-FRET-供体和受体都掺入了聚泛素链，这种基于FRET的检测不需要耗时的洗涤步骤，使其特别适用于HTS应用以及多泛素化的实时动力学分析。值得注意的是，该检测试剂盒不能检测到单泛素化。

或者，在相同的实验条件下，可以使用AXL激酶（BPS Bioscience#40180）代替Tyro3作为C-CBL泛素化底物。

泛素共价结合（Ub）是调节蛋白质稳定性、功能和定位的主要翻译后修饰。泛素化是三种酶的协同作用：泛素激活酶（E1）、泛素结合酶（E2）和泛素连接酶（E3）。泛素化的特异性和效率在很大程度上取决于E3酶，E3酶通过与E2?Ub缀合物和底物蛋白结合来指导Ub偶联级联的最后一步。这一步确保了Ub从E2-Ub转移到底物，导致其单泛素化或多泛素化。

Casitas B系淋巴瘤原癌基因-B（CBL-B）是一种RING型E3连接酶，作为T细胞活化和生长因子受体和非受体酪氨酸激酶信号传导的负调节因子。它包含一个N-末端酪氨酸激酶结合（TKB）结构域，由一个四螺旋束、一个钙结合EF手和一个Src同源（SH2）结构域组成，后面是一个接头螺旋区和负责其催化功能的RING结构域。此外，CBL-B含有富含脯氨酸的区域，介导与酪氨酸和丝氨酸磷酸化位点的关联，以及用于二聚化的泛素相关（UBA）/亮氨酸拉链结构域。CBL-B与大量参与细胞增殖、分化和细胞形态控制的靶蛋白相互作用。CBL-B的泛素连接酶活性通过酪氨酸（Tyr）363的磷酸化上调，酪氨酸位于TKB和RING结构域之间的螺旋接头中。Tyr363的磷酸化使CBL-B从其自身抑制确认中开放，使E2和底物与CBL-B结合。CBL-B例如被受体型酪氨酸激酶Tyro3磷酸化，Tyro3也是CBL-B在体外和体内泛素化的底物。

图1。CBL-B驱动的Tyro3泛素化链内TR-FRET检测试剂盒示意图

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CBL-B 驱动的 Tyro3 泛素化链内 TR-FRET 检测试剂盒：

同义词：酪氨酸蛋白激酶受体，TYRO3，BYK，DTK，RSE，SKY，TIF，E3泛素蛋白连接酶CBL-B，Casitas B细胞淋巴瘤原癌基因b，指环蛋白56，指环型E3泛素转移酶CBL-B，SH3结合蛋白CBL-B

试剂盒格式：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）

物种：人类

提供形式：CBL-B驱动的Tyro3泛素化内链TR-FRET试剂盒是一种敏感的高通量筛选（HTS）TR-FRET试剂盒，旨在均质384反应格式中测量CBL-B E3连接酶活性。

未提供但必需的材料：

能够测量时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）的荧光微孔板阅读器

可调微量移液器和无菌吸头

旋转或摇摆平台

存储/稳定性：

当按照指示存储材料时，此试剂盒从收到之日起最佳性能可维持长达6个月。

应用：

筛选抑制CBL-B Ub连接酶活性的分子，用于药物发现HTS应用

确定化合物IC50并进行CBL-B实时动力学分析

运输温度：-80°C

CBL-B 驱动的 Tyro3 泛素化链内 TR-FRET 检测试剂盒产品数据库：

BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、新型冠状病毒、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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