PARP2的PARPtrap检测试剂盒旨在使用荧光偏振(FP)在高通量筛选分析中测量PARP2/DNA复合物的形成。与PARP1类似,PARP2通过其DNA结合域识别并结合受损的DNA。与DNA的结合激活PARP2,并且在NAD+PARP2核糖基化物本身存在的情况下(自身核糖基化),由于核糖基聚合物的累积负电荷,导致PARP2从DNA解离。然而,在存在一些抑制剂的情况下,PARP仍然与DNA结合,这种现象被称为捕获。捕获的PARP-DNA复合物已被证明对癌症细胞具有高度细胞毒性,因此这种抑制剂可能是癌症治疗所需要的。
PARPtrap检测试剂盒的关键是荧光标记的寡核苷酸双链体。在没有核糖基化的情况下,PARP2与荧光探针结合,形成一个大的复合物,并导致高偏振光的发射。然而,在自身核糖基化后,PARP2与寡核苷酸双链体解离,然后寡核苷酸双链自由旋转,发出较少的偏振光(图1)。PARP2抑制剂的加入导致PARP2被捕获到荧光寡核苷酸双链体中,并以剂量依赖的方式增加FP信号。
PARPtrap测定试剂盒是一种荧光偏振均匀测定试剂盒。FP信号使用能够测量荧光偏振的荧光微板读取器来测量。
图1。PARPtrap?PARP2原理分析试剂盒
作为BPS Bioscience在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience PARP2 的 PARPtrap 检测试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
PARP2 的 PARPtrap 检测试剂盒 | BPS-78296-1 | 查看 |
PARP2 的 PARPtrap 检测试剂盒产品数据库:
检测试剂盒格式:荧光偏振
提供形式:PARPtrap? 用于PARP2酶的检测试剂盒以方便的96孔或384孔格式提供,包括纯化的PARP2酶、荧光标记的缺口寡核苷酸双链和PARPtrap?检测缓冲液2,适用于100或400个酶反应。
未提供但所需的材料:
- DTT(二硫苏糖醇)
- 能够测量荧光偏振的荧光微孔板阅读器
- 可调微量移液器和无菌吸头
- 旋转或摇摆平台
储存/稳定性:
当按照指示储存材料时,该检测试剂盒从收到日期起最佳性能可维持长达6个月。
使用说明:
详见检测协议以获取详细说明。
应用:
非常适合筛选增强PARP2/DNA捕获的小分子,在药物发现和高通量筛选(HTS)应用中,以及确定化合物IC50值。
运输温度:-80°C
禁忌:
96次反应:
PARPtrap? 用于PARP2的检测试剂盒与最终DMSO浓度高达1%兼容。我们建议将抑制剂在不超过10% DMSO的水溶液中准备,并每孔使用5 ?l。
384次反应:
PARPtrap? 用于PARP2的检测试剂盒与最终DMSO浓度高达1%兼容。我们建议将抑制剂在不超过10% DMSO的水溶液中准备,并每孔使用2.5 ?l。
相关产品:
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文献参考:
1. Murai, J. et al. Molecular Cancer Therapeutics 2014. 13: 433-443
2. Murai, J. al. Cancer Research 2012. 72: 5588-5599
3. Zandarashvili, L. et al. Science 2020. 368(6486): 30-31
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