荧光素酶是一类氧化酶的通称,它们催化发光反应,这个过程被称为生物发光(图1)。
酶活性与细胞中荧光素酶的表达量成正比,并且可以在加入适当底物后进行定量。
图1. 由荧光素酶催化的生物发光反应。
在荧光素酶反应中,细胞通过含有D-荧光素的荧光素酶底物被裂解。在报告细胞中表达的萤火虫荧光素酶催化D-荧光素转化为氧荧光素,使用ATP作为辅底物,在Mg2+存在的情况下,这个过程会发出光。发出的光量与反应中存在的荧光素酶量成正比。使用发光光度计读取发光。
One Step?萤光素酶检测系统旨在高通量、灵敏地定量哺乳动物细胞培养中的萤火虫萤光素酶活性。试剂由两种成分组成,萤光素酶试剂缓冲液(成分a)和萤光素酶反应底物(成分B)。将组分A和组分B合并形成工作溶液,该溶液含有细胞裂解和萤光素酶定量所需的所有试剂。
灵敏:对萤火虫荧光素酶活性的高灵敏度检测。
稳定:信号稳定两个多小时,在潜伏期方面具有灵活性。
方便:简单的一步式,同质协议。
高通量:一步式方案最大限度地减少了处理步骤,以支持高通量筛查应用。
兼容性:适用于含有0-10%血清和酚红的各种常见介质。
仪器:不需要带注射器的光度计。
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未提供所需材料:
需要使用与所使用的发光光度计兼容的底部透明、白色的多孔组织培养板
表达萤火虫荧光素酶的哺乳动物细胞
适当的细胞培养基
实验室平台振荡器
发光光度计
ONE-Step荧光素酶测定系统产品数据库:
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