萤火虫荧光素酶已被用作研究广泛生物反应的敏感报告物。它首先从北美的Photinus pyralis中克隆出来,在ATP和镁的存在下催化D-荧光素的氧化,发出黄光。该反应具有高量子产率,萤光素酶和荧光素都具有低毒性。这些特性使萤火虫荧光素酶成为一种常用的工具。另一方面,肾荧光素酶是ATP非依赖性的,在有氧的情况下将腔肠素转化为腔肠酰胺,发出蓝光。与荧光蛋白相比,这两种萤光素酶的半衰期相对较低,可以进行动态研究。萤火虫荧光素酶报告基因对某种刺激的反应的准确性可以通过在同一样本中归一化为对照报告基因(如Renilla荧光素酶报道基因)来提高。
两步萤光素酶(萤火虫和雷尼拉)检测系统旨在高通量、快速定量单个哺乳动物细胞培养样本中的萤火虫和雷尼拉萤光素酶。它配备了足够的试剂,可以在96孔板中进行100次100μl的测定。
该分析系统具有几个相关特征:
灵敏-高度灵敏地检测萤火虫和雷尼拉荧光素酶活性。
稳定-萤光素酶信号输出稳定一个多小时,提供了孵育时间的灵活性。
高通量-其简单的同质协议最大限度地减少了处理步骤,并支持高通量筛选应用。
兼容性-适用于各种含有高达10%血清和酚红的常见介质。
图1:两步萤光素酶(萤火虫和雷尼拉)检测系统方案概述。
萤火虫荧光素酶试剂直接加入细胞培养基中。该试剂裂解细胞,并含有一种底物,使萤火虫荧光素酶产生发光信号。接下来,将Renilla萤光素酶试剂加入到同一孔中。该试剂淬灭萤火虫荧光素酶的发光,并为Renilla荧光素酶产生Renilla萤光素酶发光信号提供底物。两种反应产生的信号都可以在光度计上方便地测量。
图2:两步萤光素酶(萤火虫和雷尼拉)检测系统中涉及的化学反应。
A.萤火虫荧光素酶试剂缓冲液(组分A)和萤火虫荧光素酶试剂底物(组分B)产生信号所涉及的化学反应。B.由莲子荧光素酶试剂缓冲液(组分C)和莲子荧光素酶试剂底物(组分D)产生信号所涉及的化学反应。
作为BPS Bioscience在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品两步荧光素酶(萤火虫和海肾)测定系统 。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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两步荧光素酶(萤火虫和海肾)测定系统 | BPS-60683 | 查看 |
两步荧光素酶(萤火虫和海肾)测定系统:
同义词:荧光素,萤火虫荧光素酶,荧光素酶缓冲液,海肾荧光素酶,荧光素酶检测缓冲液
未提供所需材料:
与读数仪器兼容的多孔组织培养板。
哺乳动物细胞在实验启动子下表达萤火虫荧光素酶,在控制启动子下表达海肾荧光素酶。
适当的细胞培养基。
实验室平台振荡器。
发光光度计
储存/稳定性:当材料按照指示储存时,该检测试剂盒在收到之日起6个月内性能最佳。
应用:监测培养的哺乳动物细胞中萤火虫(Photinus pyralis)和海肾荧光素酶的活性。基于发光的高通量药物筛选
运输温度: -20°C
两步荧光素酶(萤火虫和海肾)测定系统 产品数据库:
BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商,公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立,从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案,以推动新的药物发现。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、新型冠状病毒、CRISPR、细胞信号转导等,主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。
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