Wnt/β-catenin信号通路在胚胎发育、成人器官维护和疾病中控制着大量多样的细胞命运决定。Wnt蛋白与细胞表面的受体结合,启动信号级联,导致β-catenin的稳定和核转位。β-catenin随后与细胞核中的TCF/LEF转录因子结合,导致Wnt反应基因的转录和表达。
TCF/LEF Reporter试剂盒旨在监测培养细胞中Wnt/β-catenin信号通路的活性。该试剂盒包含转染就绪的TCF/LEF萤光素酶报告载体,这是一种Wnt通路反应报告载体。该报告基因包含一个萤火虫荧光素酶基因,该基因受位于最小启动子上游的多聚TCF/LEF反应元件的控制。TCF/LEF报告子与组成型表达的肾荧光素酶载体预混合,该载体用作转染效率的内部控制。该试剂盒还包括一种非诱导型萤火虫荧光素酶载体,该载体与组成型表达的Renilla荧光素酶矢量预混合作为阴性对照。非诱导型萤光素酶载体包含在最小启动子控制下的萤火虫萤光素酶基因,没有任何额外的反应元件。阴性对照对于确定途径特异性效应和背景萤光素酶活性至关重要。
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TCF/LEF 报告基因试剂盒(Wnt 信号通路) | BPS-60500 | 查看 |
TCF/LEF 报告基因试剂盒(Wnt 信号通路):
同义词:WNT报告基因、TCF报告基因、LEF报告基因、荧光素酶报告基因、基于细胞的检测试剂盒、基于细胞的检测、报告基因检测试剂盒
供应内容:
报告基因:TCF/LEF荧光素酶报告基因载体 + 恒定表达海肾荧光素酶载体
阴性对照报告基因:非诱导型荧光素酶载体 + 恒定表达海肾荧光素酶载体
未供应但必需的材料:
哺乳动物细胞系及适当的细胞培养基
96孔组织培养板或96孔经处理的白色透明底检测板(康宁 # 3610)
哺乳动物细胞系的转染试剂[我们使用Lipofectamine? 2000(Invitrogen # 11668027)。然而,其他转染试剂同样有效。]
Opti-MEM I 减血清培养基(Invitrogen #31985-062)
两步法荧光素酶(萤火虫 & 海肾)检测系统:
两步法荧光素酶(萤火虫 & 海肾)检测系统(BPS Bioscience, #60683):该系统可直接在生长培养基中检测细胞。它可以与任何荧光素酶检测器一起使用。不需要自动化注射器。
荧光素酶检测器
浓度:报告基因和阴性对照报告基因均以60 ng DNA/?l(各500 ?l)提供。
TCF/LEF 报告基因试剂盒(Wnt 信号通路)产品数据库:
文献参考:
1. Clevers H (2006) Wnt/beta-catenin signaling in development and disease. Cell 127(3):469-480.
2. Chen B et al. (2009) Small molecule-mediated disruption of Wnt-dependent signaling in tissue regeneration and cancer. Nature Chemical Biology 5(2):100-107.
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