BMA Biomedicals 钙粒蛋白 B，MRP14（S100A9）ELISA 试剂盒检测原理

替代名称：MRP8：S100A8，Calgranulin A，CP-10（在小鼠中）；MRP14：S100A9，Calgranulin B；MRP8/14：Calprotectin，L1，（p8,14），p34。

迁移抑制因子相关蛋白（MRP）-8和-14属于与髓系细胞分化相关的S-100钙结合蛋白家族。它们在静止的中性粒细胞、角质形成细胞（特别是银屑病）、浸润组织巨噬细胞和活动性炎症疾病中的上皮细胞中高度表达。巨噬细胞亚群在慢性或急性炎症中的异质性反映在MRP8和MRP14的不同表达上。表达MRP8和MRP14的吞噬细胞属于早期浸润细胞，而MRP8单独存在于慢性炎症组织中。MRP8、MRP14和Ca2+依赖性MRP8/14异质复合物的部分拮抗作用使其成为多功能介质。

作为BMA Biomedicals在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BMA Biomedicals热销产品钙粒蛋白 B，MRP14（S100A9）ELISA 试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

钙粒蛋白 B，MRP14（S100A9）ELISA 试剂盒测试原理：

一步非竞争性夹心法，试剂限制在辣根过氧化物酶催化的四甲基联苯胺颜色反应中，包括停止反应和在多孔板阅读器中450/630nm处的读取。提供的试剂：

S-1008A：即用型预涂覆并稳定的微孔板 + 微孔板封口器（各1个）。

S-1008B：500ng标准品，一种稳定的冻干重组MRP14制剂。

S-1008D*：3倍浓缩的测定缓冲液，轻微浑浊的蓝色溶液。

S-1008E：0.48%四甲基联苯胺，0.18% H2O2在乙醇/丙酮9:1中。保持避光。

S-1008F*：TMB底物缓冲液（柠檬酸钾）。

S-1008R*：试剂混合物：两瓶1.1ml（每瓶）的混合物，包括HRPO偶联的检测抗体，11倍浓缩。

所有标有星号()的液体溶液都含有0.1%（体积/体积）的Kathon CG作为防腐剂。

该试剂盒在冷藏条件下至少稳定至标示日期。

未提供的物料：停止溶液（1N硫酸，见下文），用于稀释的塑料管；用于洗涤的等渗盐水，移液管，重复移液管，8通道移液管（2个），微孔板洗涤器和阅读器（450nm/630nm滤光片）。

开始测试前的准备：在开始之前，让所有试剂预热至室温，特别是干燥的预涂覆板。强烈建议对样品和标准品进行双重测试。在开始测试之前，除了TMB底物溶液外，准备所有以下稀释：

预涂覆板

将干燥的预涂覆板（或将用于测试的条数）从冷藏中取出，覆盖并在室温或37°C下孵育2小时。

测定缓冲液

将1份随附的浓缩液（S-1008D）与2份蒸馏水混合，以获得测定缓冲液。示例：测量15ml浓缩液并加入30ml水。

标准品：

用1.0ml测定缓冲液溶解冻干标准品。用涡旋器彻底涡旋数次，每次10秒，并在之间孵育几分钟。这个500ng/ml的标准品现在已准备好进一步稀释。如果需要，将未使用的标准品部分存放在-20°C以备后用。

稀释：

用“50”、“12.5”、“3.13”、"0.78" 和 "0.2" 标记五个1.5ml聚丙烯管。

向“50”管中加入450μl测定缓冲液，向其他四个管中加入360μl测定缓冲液。

向“50”管中加入50μl的500ng/ml库存溶液并充分混合。

从“50”溶液中取出120μl加入“12.5”管中，充分混合，并继续按递减顺序进行其他管的连续稀释，总是向下一个较低浓度的管中加入120μl。这给出了五个标准溶液，用于生成带有双重标准的标准曲线。 试剂混合物（工作稀释） 将1份随附的试剂混合物（S-1008R）与10份测定缓冲液混合。示例：如果你处理包含32个孔的四条带，向3.2ml测定缓冲液中加入0.32ml试剂混合物。根据你的需求调整这个体积。 样品： 将样品分装存放在-20°C或更低温度。只使用一次分装，并在适当稀释的测定缓冲液中稀释你的样品。我们推荐正常血清或血浆的稀释比例为1:5；关节液为1:20 - 1:1000；呼出物、唾液、BAL和尿液为1:2。示例：在台式离心机中离心你的血清样本5分钟，然后向400μl测定缓冲液中加入100μl。

BMA Biomedicals是瑞士的一家免疫学试剂制造商，也是提供免疫化学物质的供应商。1989年由免疫学家、生化学家和生物学家创立，主要服务/产品：单克隆和多克隆抗体的生产和衍生化的抗体；以及在炎症、传染病、止血、肿瘤相关疾病等，BMA 的主要专长在于抗体在免疫组织化学和酶免疫测定(ELISA)中的应用，在免疫学技术中的应用。BMA 拥有自己的设施，拥有先进的分析和生产基础设施。专业知识在于单克隆和多克隆抗体的生产和衍生化，以及它们在免疫技术中的应用。

作为BMA Biomedicals在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BMA Biomedicals产品。