β2微球蛋白ELISA试剂盒，血清血浆、尿液的检测和计算

Calbiotech-β2微球蛋白ELISA试剂盒用于定量测定人体血清中β-2微球蛋白（B2MG）的浓度。

艾美捷Calbiotech-β2微球蛋白ELISA试剂盒：

目录编号   BM010T

产品类型 ELISA

规格  96次测试（12x8易碎条状井）

标准范围 0.625-10 微克/毫升

分析灵敏度

0.625 微克/毫升

样本体积 20 微升/孔

物种 人类

储存和稳定性 产品应储存在2-8°C。

注意事项 仅供研究使用。不用于诊断程序。

β2微球蛋白ELISA试剂盒检测原理：

B2MG ELISA检测基于固相酶联免疫吸附试验的原理。该检测系统利用一种独特的单克隆抗体，针对完整的γ-2微球蛋白分子上的独特抗原决定簇。小鼠单克隆抗B2MG抗体用于固相固定（在微量孔上）。绵羊抗B2MG抗体存在于抗体-酶（辣根过氧化物酶）结合物溶液中。稀释的测试样品首先在37℃下与固定抗体反应30分钟。然后加入绵羊抗B2MG HRP偶联物，并在37℃与固定抗原反应30分钟，使B2MG分子夹在固相和酶联抗体之间。用水清洗这些孔以去除未结合的标记抗体。加入TMB试剂溶液，在室温下孵育20分钟，导致蓝色出现。通过添加停止溶液停止显色，将颜色变为黄色。B2MG的浓度与测试样品的颜色强度成正比。在450nm处用分光光度法测量吸光度。

血清和血浆检测程序

1. 使用前需将患者血清、血浆和对照血清稀释以获得最佳结果。

准备一系列小管（如1.5毫升微量离心管），并将10 ?l血清与1.0 ml样本稀释液混合（101倍稀释）。标准品不需要稀释，它们已经预先稀释了101倍。

2. 在架子上固定所需数量的包被孔。

3. 向相应的孔中分配20 ?l的标准品、稀释样本和稀释对照品。

4. 向每个孔中分配200 ?l的样本稀释液。

5. 彻底混合30秒钟。完全混合非常重要。

6. 在37°C下孵育30分钟。

7. 通过将板内内容甩入废物容器中移除孵育混合物。

8. 清除所有孔中的液体。用300 ?l的1X洗涤缓冲液冲洗孔三次。在吸收性纸巾或纸巾上拍干。

9. 用力在吸收性纸巾或纸巾上拍打孔以去除所有残留的液体滴。

10. 向每个孔中分配200 ?l的酶结合物试剂。轻轻混合10秒钟。

11. 在37°C下孵育30分钟。

12. 按照步骤7、8和9中描述的方法移除内容物并冲洗板。

13. 向每个孔中分配100 ?l的TMB试剂。

14. 轻轻混合10秒钟。

15. 在室温下暗处孵育20分钟。

16. 通过向每个孔中添加100 ?l的终止溶液来停止反应。

17. 轻轻混合10秒钟。确保所有的蓝色完全变为黄色非常重要。

18. 在15分钟内使用微孔板读取器读取450nm处的吸光度。

血清和血浆结果计算

1. 计算每组参考标准、对照品和患者样本的平均吸光度值（A450）。

2. 通过在图表纸上绘制每个参考标准的平均吸光度与其浓度（以?g/ml为单位）的图表，构建标准曲线，吸光度值在垂直或Y轴上，浓度在水平或X轴上。

3. 使用每个样本的平均吸光度值从标准曲线上确定相应的B2MG浓度（以?g/ml为单位）。

尿液检测程序

1. 尿液样本需要用样本稀释液进行10倍稀释（即50 ?l尿液 + 450 ?l样本稀释液）。

2. 从步骤2到步骤18，按照血清/血浆测试的相同检测程序进行。

尿液检测结果计算

1. 计算每组参考标准、对照品和患者样本的平均吸光度值（A450）。

2. 通过在图表纸上绘制每个参考标准的平均吸光度与其浓度（以?g/ml为单位）的图表，构建标准曲线，吸光度值在垂直或Y轴上，浓度在水平或X轴上。

3. 使用每个样本的平均吸光度值从标准曲线上确定相应的β2MG浓度（以?g/ml为单位）。将计算值除以10.1（由于β-2微球蛋白标准品已经预先稀释了101倍，因此从尿液样本获得的结果应进一步除以10.1）。例如，如果从标准曲线计算出的一个尿液样本的值为2.40 ?g/ml；那么实际值将是2.40 ?g/ml × 10.1 = 0.238 ?g/ml。

Calbiotech-β2微球蛋白ELISA试剂盒标准曲线示例：

典型的标准运行结果，以450 nm处的吸光度读数在Y轴上显示，对应于X轴上显示的B2MG浓度。此标准曲线仅供示例，不应用于计算未知数。每个用户应获取自己的数据和标准曲线。

艾美捷科技是Calbiotech的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。