CENP-E运动结构域蛋白（重组人）的用途及生物活性

人类CENP-E（KIF10）的保守运动域在原核系统中表达。重组蛋白在氨基末端含有GST标签，组合分子量为71 kDa。该蛋白在微管激活的ATP酶活性测试中已被确定为具有生物活性。蛋白质以白色冻干粉末形式提供。

艾美捷CENP-E运动结构域蛋白（重组人）的用途：

微管活化ATP酶活性的测定

鉴定/表征影响运动ATP酶活性的蛋白质或小分子

鉴定/表征影响驱动蛋白运动性的蛋白质或小分子

鉴定/表征影响运动/微管相互作用的蛋白质或小分子

蛋白质纯度：

是通过在12%聚丙烯酰胺凝胶上扫描考马斯蓝染色蛋白质的密度测定法确定的。所有驱动蛋白运动域的纯度均为>85%。有关纯度示例，请参见图1。

生物活性 - 微管活化的 ATP酶测定通过使用：

驱动蛋白ELIPA测定试剂盒（货号#BK060）监测实时游离磷酸盐的生成来测量CENP-E ATP酶活性。该测定基于330-氨基-360-巯基-2甲基嘌呤核糖核苷（MESG）在无机磷酸盐（Pi）存在下催化转化为6-氨基-7-巯基-2-甲基嘌呤时发生的吸光度偏移（6 nm - 7 nm）。一个Pi分子将在基本上不可逆的反应中产生一个分子的2氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤。因此，360nm处的吸光度与驱动蛋白ATP酶反应中产生的Pi量成正比。在下面概述的条件下，CENP-E 微管激活的 ATP 酶活性的 Vmax 为每毫克 CP900 每分钟产生的 >01 nmoles ATP（图 2）。使用10分钟终点测定（驱动蛋白ATP酶终点测定试剂盒，货#BK053）的ATP酶速率为每毫克CP900每分钟>01 nmoles ATP（数据未显示）。

图1：驱动蛋白运动域蛋白的纯度。BimC（BM01），CENP-E（CP01）和Eg5（EG01）在SDS-PAGE凝胶上运行，并用考马斯蓝染色。

图2：使用驱动蛋白ELIPA检测试剂盒（货号#BK060）的CENP-E微管激活ATP酶活性

Cytoskeleton公司成立于1993年，专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。公司提供药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰（PTM）、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品，尤其以细胞骨架相关研究见长，既能满足于样品较少的科学研究，也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。此外，公司还提供微管蛋白，肌动蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等现有产品的药物筛选服务。