微管结合蛋白 Spin Down 检测试剂盒解决方案

该测定允许鉴定将在体外与微管（MTs）结合的蛋白质。该测定依赖于这样一个事实，即MT在以100,000 x g 离心时会沉淀。因此，与MT相关的任何蛋白质都会在离心过程中沉淀。对上清液与沉淀级分进行简单的SDS-PAGE分析将确定蛋白质是否能够与MTs相关联。本手册中给出的测定描述适用于重组表达的“测试”蛋白，但是，该测定可以适用于细胞裂解物或体外翻译产物。

应该注意的是，应获得MT关联的体内确认，以确认该蛋白质可以归类为MAP。这种关联不需要在整个细胞周期中发生，甚至可以在发育上受到调节，事实上，MAP与微管的短暂关联是常态而不是例外。

艾美捷微管结合蛋白 Spin Down 检测试剂盒 #BK029用途：

确定蛋白质或化合物是否与微管结合。

测试各种缺失突变体仍然结合微管的能力，然后计算它们对微管的亲和力，从而鉴定微管结合位点。

在ATP（驱动蛋白）或GTP（动力蛋白）的不可水解类似物存在下，从细胞中提取这些或在突变时显示其结合亲和力。

微管结合蛋白 Spin Down 检测试剂盒内容：

该试剂盒包含足够的材料，可根据检测量进行 30-100 次检测。包括以下试剂：

微管蛋白， >99% 纯度， （# T240）

微管相关蛋白级分（阳性对照）（# MAPF）

牛血清白蛋白（BSA）蛋白（阴性对照）

一般微管蛋白缓冲液（# BST01）

微管蛋白甘油缓冲液（# BST05）

GTP （# BST06）

微管重悬缓冲液

紫杉醇（# TXD01）

二甲基亚胺

盐提取缓冲液

包含详细协议和广泛故障排除指南的手册

微管结合蛋白 Spin Down 检测试剂盒示例结果：

通过将MT与微管相关蛋白级分（Cat.#MAPF）或BSA相结合来测试微管结合旋下测定。正如预期的那样，MAPF与微管共沉积，而BSA则不（图1）

图：使用 BK029 的 MAP 旋速测定。将微管与缓冲液（MT），MAP蛋白（MT + MAPF）或BSA（MT + BSA）混合，并通过100,000×g离心沉淀MTs.通过SDS-PAGE检查上清液（S）和沉淀（P）级分。MAP蛋白，但不是BSA，与MT结合并共沉淀。MAP（MAPF）或BSA（BSA）蛋白单独不能沉淀。

Cytoskeleton公司成立于1993年，专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。公司提供药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰（PTM）、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品，尤其以细胞骨架相关研究见长，既能满足于样品较少的科学研究，也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。此外，公司还提供微管蛋白，肌动蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等现有产品的药物筛选服务。