Tubulin聚合检测（荧光法-96assays 猪脑 tubulin）试剂盒

微管蛋白聚合 HTS 测定使用 >99% 纯微管蛋白，基于荧光 （BK011P）。该测定是确定药物或蛋白质对微管蛋白聚合影响的经济一步法。它是对最初由Bonne，D.等人描述的测定的改编（1）。聚合之后是荧光增强，因为随着聚合发生，荧光报告基因被掺入微管中。标准测定使用神经元微管蛋白（Cat.#T240），其产生代表微管形成的三个阶段的聚合曲线;即成核、生长和稳态平衡。其他微管蛋白，如HeLa细胞微管蛋白（货号#H001）也可用于该测定。每次检测的低体积为50μl，微管蛋白浓度低，最终浓度为2mg/ml（每次检测100μg），使其成为研究更昂贵的癌细胞微管蛋白试剂和高通量应用比较好的选择。

艾美捷Tubulin聚合检测（荧光法-96assays 猪脑 tubulin）试剂盒用途：

用于抗癌化合物的经济高效的高通量筛选。

测量化合物IC50和微管蛋白特异性的基础研究。

筛选蛋白质对微管蛋白聚合活性的影响。

药理学本科/研究生班的教学辅助。

Tubulin聚合检测（荧光法-96assays 猪脑 tubulin）试剂盒内容：

试剂盒含有足够的材料，可用于50μl格式的96次测定。包括以下组件：

1.>99%纯微管蛋白（#T240）

2.具有荧光报告子的通用微管蛋白缓冲液

3.微管甘油缓冲液（#BST05）

4.GTP溶液（#BST06）

5.紫杉醇阳性对照（#TXD01）

6.半区96孔板。黑色，平底

7.包含详细协议和广泛故障排除指南的手册

Tubulin聚合检测（荧光法-96assays 猪脑 tubulin）试剂盒示例结果：

与微管蛋白相互作用的化合物或蛋白质通常会改变聚合的一个或多个特征相。例如，图1显示了在标准聚合反应中加入抗有丝分裂药物紫杉醇的效果。3?M浓度的紫杉醇消除了成核阶段，并提高了生长阶段的Vmax。因此，该测定法的一个应用是鉴定新的抗有丝分裂剂。图1还显示了添加微管失稳药物长春碱的效果。在最终浓度为3?M时，长春碱会导致Vmax急剧降低，最终聚合物质量降低。

图：使用基于荧光的微管蛋白聚合测定法（BK011P）进行微管蛋白聚合。微管蛋白与紫杉醇或长春碱单独孵育（对照）。每种情况都测试了两次。通过在360nm处激发和在420nm处发射来测量聚合。对照聚合曲线标记了微管蛋白聚合的三个阶段；I： 成核，II：生长，III：稳态平衡。

文献参考：

Bonne, D., Heusele, C., Simon, C., and Pantaloni, D.  (1985).  4’, 6-Diamidino-2-phenylindole, a fluorescent probe for tubulin and mictrotubules. J. Biol. Chem. 260, 2819-2825.

Cytoskeleton公司成立于1993年，专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。公司提供药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰（PTM）、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品，尤其以细胞骨架相关研究见长，既能满足于样品较少的科学研究，也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。此外，公司还提供微管蛋白，肌动蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等现有产品的药物筛选服务。