Biogradetech Phosphatidylethanolamine (PE) 琼脂糖珠：生物化学实验中的多功能脂质工具

脂质包被珠被设计用于蛋白质下拉实验。用于检测纯化蛋白质、细胞裂解物中蛋白质的脂质结合，或放射性标记的体外翻译产物的结合。

磷脂酰乙醇胺（PE）珠由琼脂糖组成，每1毫升珠与10纳摩尔的磷脂酰乙醇铵（PE）结合，足以进行几次蛋白质结合实验。每1mL磷脂酰乙醇胺（PE）珠粒包括少量对照珠粒（P-B000）。更多数量的控制珠也可供购买。

作为Biogradetech独家代理，艾美捷科技强烈推荐Biogradetech热销产品Phosphatidylethanolamine (PE) 琼脂糖珠。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

脂质珠检测说明：

1. 脂质包被珠有1毫升和0.1毫升两种规格，以50%的悬液形式在1X PBS缓冲液中提供。

2. 每1毫升的订单附带200微升的对照珠。对照珠也可单独购买，建议用于分析。

3. 储存在2-8°C。产品对温度和光线敏感，请勿冷冻。

4. 以1000 x g或更低的速度离心珠。不要高速离心珠，因为这可能会压碎珠。

5. 每1毫升珠中总共有10毫摩尔的结合脂质。

6. 珠的直径范围在45-165微米之间。

7. 每个蛋白质使用50-100微升的50%悬液脂质包被珠和对照珠。

8. 了解阳性对照蛋白列表。

脂质珠 - 蛋白质下拉协议

我们提供以下协议作为指南，并强烈鼓励研究人员查阅科学文献并进行优化实验，以确立对其感兴趣的蛋白质z有利的条件。

1. 充分混合珠（不要使用涡旋）。将50-100微升的50%珠悬液转移到0.5-1.5毫升的管中。

2. 以1000 x g或更低的速度离心珠。小心移除上清液，避免丢失珠。

3. 用洗涤缓冲液的10倍过量洗涤珠。轻轻混合，孵育1-2分钟。重复洗涤步骤两次。

4. 小心移除洗涤上清液，并将珠在含有您的蛋白质的结合缓冲液中重新悬浮。

a. 对于纯化的蛋白质，使用1-10微克的蛋白质，用足够的结合缓冲液稀释形成50%脂质珠悬液。

b. 对于细胞裂解物、提取物、亚细胞组分：使用大约1毫克的总蛋白质对1毫升结合缓冲液。将整个1毫升准备好的样品加入到您洗涤过的珠中。

5. 孵育蛋白质-珠溶液1-3小时。孵育可以在室温或4°C下进行，取决于您蛋白质的稳定性。需要连续运动以保持珠悬浮。

6. 离心珠并小心移除上清液。如果需要，上清液可以用来监测未结合的蛋白质。

7. 用洗涤缓冲液的10倍过量洗涤珠。轻轻混合，孵育1-2分钟。重复洗涤步骤五次。如果您选择在结合缓冲液中使用牛血清白蛋白（BSA），请确保在进行下一步之前将其彻底洗出。

8. 在最后一次洗涤后，通过向珠中加入等体积的2X Laemmli样品缓冲液（或类似物）并加热至70°C 10分钟来洗脱结合的蛋白质。

9. 加热后，离心珠并移除上清液。将上清液储存在4°C下，直到分析。丢弃珠。

10. 蛋白质可以通过SDS-PAGE分离，并通过凝胶的Coomassie蓝染色、蛋白质转移和免疫印迹来检测感兴趣的蛋白质，或进行自显影。

文献参考：

1) Hakuno, D., et al. (2018). “Hepatokine α1-Microglobulin Signaling Exacerbates Inflammation and Disturbs Fibrotic Repair in Mouse Myocardial Infarction.” Scientific Reports 8(1): 16749.

2) Dudley, L. J., et al. (2019). “Intrinsic lipid binding activity of ATG16L1 supports efficient membrane anchoring and autophagy.” The EMBO Journal: e100554.

Biogradetech成立于2015年，总部位于美国加利福尼亚州，早期以产品技术研发服务起家，逐步发展了广泛的产品线，并将其商业化销售，包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。适用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域。