Cardiolipin琼脂糖珠--提高实验效率，减少样本损失

Cardiolipin（心磷脂）是一种主要存在于线粒体内膜的重要磷脂，对于维持线粒体功能至关重要。在生物化学研究中，Cardiolipin琼脂糖珠作为一种分析工具，具有特定的应用。

Cardiolipin琼脂糖珠是由心磷脂与琼脂糖基质结合形成的珠状颗粒，通常用于生物化学和分子生物学实验中。这些珠粒可以作为固相支持物，用于亲和层析、酶联免疫吸附测定（ELISA）等多种分析技术。

艾美捷Cardiolipin琼脂糖珠（BGT-OPU-101）裂解缓冲液：

盐（10-20 mM HEPES，pH 7.4，100-150 mM NaCl）

非离子洗涤剂*（如0.1–2%Igepal）

二价阳离子（0-10 mM EDTA和/或EGTA）

蛋白酶抑制剂（完整的迷你蛋白酶片、原钒酸钠、氟化钠）

脂质珠?检测说明：

1. 脂质包被珠有1 mL和0.1 mL两种规格，以50%的浆液形式在1X PBS缓冲液中提供。

2. 订购1 mL脂质珠，附带200 ?L的对照珠。

3. 储存于2-8°C。产品对温度和光线敏感，请勿冷冻。

4. 以1,000 x g或更低速度离心珠。不要高速离心珠，因为这可能会压碎珠。

5. 每1 mL珠中总共有10纳摩尔的结合脂质。

6. 珠的直径范围在45至165微米之间。

7. 每个蛋白使用50-100 ?L的50%浆液脂质包被珠和对照珠。

脂质珠? - 蛋白拉下协议：

1. 充分混合珠（不要涡旋）。将50-100 ?L的50%珠浆液转移到0.5-1.5 mL的管中。

2. 以1,000 x g或更低速度离心珠以沉淀。小心移除上清液，避免丢失珠。

3. 用洗涤缓冲液的10倍过量洗涤珠。轻轻混合，孵育1-2分钟。重复洗涤步骤两次。

4. 小心移除洗涤上清液，并将珠在含有您的蛋白的结合缓冲液中重新悬浮。

a. 对于纯化的蛋白，使用1-10微克的蛋白，稀释在足够的结合缓冲液中形成50%脂质珠浆液。

b. 对于细胞裂解物、提取物、亚细胞分数：使用大约1毫克的总蛋白对1 mL结合缓冲液。将整个1 mL准备好的样品加入您洗涤过的珠中。

5. 孵育蛋白-珠溶液1-3小时。孵育可以在室温或4°C下进行，取决于您蛋白的稳定性。需要连续运动以保持珠悬浮。

6. 沉淀珠并小心移除上清液。如果需要，上清液可以用来监测未结合的蛋白。

7. 用洗涤缓冲液的10倍过量洗涤珠。轻轻混合，孵育1-2分钟。重复洗涤步骤五次。如果您选择在结合缓冲液中使用牛血清白蛋白（BSA），请确保在进入下一步之前将其彻底洗出。

8. 在最后一次洗涤后，通过向珠中加入等体积的2X Laemmli样品缓冲液（或类似物）并加热至70°C 10分钟来洗脱结合的蛋白。

9. 加热后，沉淀珠并移除上清液。将上清液储存在4°C下，直到分析。丢弃珠。

10. 蛋白可以通过SDS-PAGE分离，并通过凝胶的Coomassie蓝染色、蛋白转移和免疫印迹来检测感兴趣的蛋白，或进行自显影。

研究应用：

Cardiolipin琼脂糖珠在研究线粒体功能、线粒体相关疾病、以及线粒体蛋白质的分离和鉴定中发挥着重要作用。它们可以用来富集和纯化与心磷脂相互作用的蛋白质，进而分析这些蛋白质的功能。

实验操作优势：

使用Cardiolipin琼脂糖珠进行实验操作简便，可以通过简单的吸附和洗脱步骤来分离目标蛋白。这种方法减少了实验步骤，提高了实验效率，并且有助于减少样本损失。

稳定性和重复性：

Cardiolipin琼脂糖珠具有良好的化学和物理稳定性，可以在不同的实验条件下保持一致的性能。这为实验结果的重复性和可靠性提供了保障。

跨学科研究潜力：

Cardiolipin琼脂糖珠不仅在生物学研究中有应用，还在医学、药理学和环境科学等多个领域展现出其潜力，尤其是在研究线粒体功能障碍相关疾病，如帕金森病。