Biogradetech IgM (马) ELISA试剂盒检测程序说明

IgM检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于测量马生物样品中的IgM。如果ELISA在预期用途之外使用，用户可能需要优化saiduse

作为Biogradetech独家代理，艾美捷科技强烈推荐Biogradetech热销产品IgM (马) ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

IgM (马) ELISA试剂盒：

抗体类型 ELISA

宿主 山羊

特异性/目标 IgM

大小 1.0

检测范围 10 ng/ml - 320 ng/ml

灵敏度 3.801 ng/ml

检测时间 60分钟

样本类型 血浆、血清

储存条件 2-8摄氏度

检测原理：

双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在该测定中，样品中存在的IgM与已吸附在聚苯乙烯微量滴定池表面的抗IgM抗体反应。在通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）缀合的抗IgM抗体。这些酶标记的抗体与先前结合的IgM形成复合物。在另一个洗涤步骤之后，通过添加无色底物3，3’，5，5’-四甲基联苯胺（TMB）来测定与免疫吸附结合的酶。结合酶的数量与所测试样品中IgM的浓度直接相关；因此，在450nm处的吸光度是测试样品中IgM浓度的测量值。试验样品中IgM的量可以根据标准曲线进行插值，并根据样品稀释度进行校正。

试剂准备：

- 使用前将所有试剂恢复至室温（16°C至25°C）。

- 稀释液浓缩液 - 所提供的稀释液是5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1部分缓冲液浓缩液，4部分dH2O）稀释1/5。

- 洗涤液浓缩液 - 所提供的洗涤液是20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1部分缓冲液浓缩液，19部分dH2O）稀释1/20。在低温储存时浓缩液中可能会出现结晶。在稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解结晶。

- 酶-抗体结合物 - 根据每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量，向每个测试条使用的990 ?L 1X稀释液中添加10 ?L酶-抗体结合物。使用前立即稀释，并避免光照。均匀混合，但要轻柔。避免产生泡沫。

- 预涂层ELISA微孔板 - 按提供的状态准备使用。揭开铝箔袋，从袋中取出板。移除在测试中不会使用的条和孔，并将它们连同干燥剂一起重新封入袋中。

- 马IgG校准物 - 根据批次特定的分析证书准备。

所需材料但未提供：

- 用于制作和分配稀释液的精密移液管（2 ?L至100 ?L）

- 试管

- 喷雾瓶或微孔板洗涤器/吸液器

- 蒸馏水或去离子水

- 微孔板阅读器

- 用于制备试剂和缓冲溶液的各种玻璃器皿

- 用于样本收集的离心机

- 用于血浆收集的抗凝剂

- 计时器

样本收集和处理：

所有血液成分和生物材料应被视为潜在危险物质。在处理和处置时遵循通用预防措施。如果血样出现凝血、严重溶血、脂血，或者样本的完整性受到质疑，请做记录并谨慎解释结果。下面列出的样本收集和储存条件是一般性的指导原则。样本的稳定性尚未评估。

- 血清样本 - 应通过静脉穿刺收集血液。血液凝固后，通过离心分离血清。移除血清并立即检测，或分装后储存在-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融。

- 血浆样本 - 应将血液收集到含有抗凝剂的容器中，然后进行离心。立即检测或分装后储存在-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融。

- 尿液样本 - 使用无菌或干净的尿液收集器收集中段尿。离心以去除细胞碎片。立即检测或分装后储存在-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融。

- 已知干扰物质 - 浓度高于0.1%的氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

Biogradetech成立于2015年，总部位于美国加利福尼亚州，早期以产品技术研发服务起家，逐步发展了广泛的产品线，并将其商业化销售，包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。适用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域。