Biogradetech高效特异性马IgG检测： IgG (马) ELISA试剂盒

IgG检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于测量马生物样品中的IgG。如果ELISA在预期用途之外使用，用户可能需要优化saiduse。

作为Biogradetech独家代理，艾美捷科技强烈推荐Biogradetech热销产品IgG (马) ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

IgG (马) ELISA试剂盒：

更多信息

抗体类型 ELISA

宿主 山羊

特异性/目标 IgG h+l

大小 1.0

检测范围 6.25 ng/ml - 400 ng/ml

灵敏度 2.217 ng/ml

检测时间 60分钟

样本类型 牛奶、血浆、血清

储存条件 2-8摄氏度

检测原理：

双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在这种测定中，样品中存在的IgG与抗IgG抗体反应，抗IgG抗体已吸附在聚苯乙烯微量滴定池的表面。在通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）缀合的抗IgG抗体。这些酶标记的抗体与先前结合的IgG形成复合物。在另一个洗涤步骤之后，通过添加无色底物3，3’，5，5’-四甲基联苯胺（TMB）来测定与免疫吸附结合的酶。结合酶的数量与所测试样品中IgG的浓度直接相关；因此，在450nm处的吸光度是测试样品中IgG浓度的测量值。测试样品中IgG的量可以根据标准曲线进行插值，并根据样品稀释度进行校正。

试剂准备：

- 使用前将所有试剂恢复至室温（16°C至25°C）。

- 稀释液浓缩液 - 所提供的稀释液是5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1部分缓冲液浓缩液，4部分dH2O）稀释1/5。

- 洗涤液浓缩液 - 所提供的洗涤液是20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1部分缓冲液浓缩液，19部分dH2O）稀释1/20。在低温储存时浓缩液中可能会出现结晶。在稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解结晶。

- 酶-抗体结合物 - 根据每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量，向每个测试条使用的990 ?L 1X稀释液中添加10 ?L酶-抗体结合物。使用前立即稀释，并避免光照。均匀混合，但要轻柔。避免产生泡沫。

- 预涂层ELISA微孔板 - 按提供的状态准备使用。揭开铝箔袋，从袋中取出板。移除在测试中不会使用的条和孔，并将它们连同干燥剂一起重新封入袋中。

- 马IgG校准物 - 根据批次特定的分析证书准备。

检测程序：

1. 所有样品和标准品应以双份进行检测。

2. 标准品和测试样品应尽快装入ELISA孔中，以避免OD读数的变化。使用多通道移液管可以减少这种情况的发生。

- 准确移液100 μL标准品0（0.0 ng/mL）两份

- 准确移液100 μL标准品1（6.25 ng/mL）两份

- 准确移液100 μL标准品2（12.50 ng/mL）两份

- 准确移液100 μL标准品3（25 ng/mL）两份

- 准确移液100 μL标准品4（50 ng/mL）两份

- 准确移液100 μL标准品5（100 ng/mL）两份

- 准确移液100 μL标准品6（200 ng/mL）两份

- 准确移液100 μL标准品7（400 ng/mL）两份

3. 将100 μL样品（两份）移液到预先指定的孔中。

4. 在室温下孵育微孔板三十（30 ± 2）分钟。孵育期间保持板盖好并保持水平。

5. 孵育后，吸出孔中的内容物。

6. 用适当稀释的洗涤液完全填充每个孔并吸出。重复三次，总共四次洗涤。如果手动洗涤：用洗涤缓冲液完全填充孔，然后将板倒置，将内容物倒/摇出到废物容器中。随后将孔在吸水纸上用力敲击以去除残留缓冲液。重复三次，总共四次洗涤。

7. 向每个孔中准确移液100 μL适当稀释的酶-抗体结合物。在室温下孵育二十（20 ± 2）分钟。孵育期间保持板盖好，置于暗处并保持水平。

8. 如步骤5/6所述洗涤并吸干孔。

9. 向每个孔中准确移液100 μL TMB底物溶液。

10. 在暗处室温下精确孵育十分钟（10）。

11. 十分钟后，向每个孔中添加100 μL终止溶液。

12. 在30分钟内测定每个孔中内容物的吸光度（450 nm）。根据制造商的规格校准板阅读器。

Biogradetech成立于2015年，总部位于美国加利福尼亚州，早期以产品技术研发服务起家，逐步发展了广泛的产品线，并将其商业化销售，包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。适用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域。