IgM检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法(ELISA),用于测量牛生物样品中的IgM。如果ELISA在预期用途之外使用,用户可能需要优化saiduse。
作为Biogradetech独家代理,艾美捷科技强烈推荐Biogradetech热销产品IgM (牛) ELISA试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
IgM (牛) ELISA试剂盒 | BGT-KET-125 | 查看 |
IgM (牛) ELISA试剂盒:
抗体类型 ELISA
反应性 牛/乳牛
宿主 兔子
特异性/靶标 IgM
大小 1.0
检测范围 12.5 ng/ml - 400 ng/ml
灵敏度 3.006 ng/ml
检测时间 80分钟
样本类型 血浆、血清
储存条件2-8摄氏度
检测原理:
双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在该测定中,样品中存在的IgM与已吸附在聚苯乙烯微量滴定池表面的抗IgM抗体反应。在通过洗涤去除未结合的蛋白质后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)缀合的抗IgM抗体。这些酶标记的抗体与先前结合的IgM形成复合物。在另一个洗涤步骤之后,通过添加无色底物3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)来测定与免疫吸附结合的酶。结合酶的数量与所测试样品中IgM的浓度直接相关;因此,在450nm处的吸光度是测试样品中IgM浓度的测量值。试验样品中IgM的量可以根据标准曲线进行插值,并根据样品稀释度进行校正。
样本稀释
在进行检测前,需要对每个测试样本进行稀释。每次进行检测时,所有样本都应在两个重复中进行检测。推荐的稀释度仅为建议。稀释度应基于未知样本的预期浓度,以便稀释后的样本落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样本水平,强烈建议在运行整个板之前,先对一个或两个代表性样本进行系列稀释。
- 血清样本 - 推荐的起始稀释度为1/20,000。要准备1/20,000的样本稀释,将5 ?L的样本转移到495 ?L的1X稀释液中。这会给您1/100的稀释度。接下来,将1/100的稀释液通过将4 ?L转移到796 ?L的1X稀释液中进行稀释。这会给您1/20,000的稀释度。在每个阶段都要彻底混合。
- 血浆样本 - 推荐的起始稀释度为1/20,000。要准备1/20,000的样本稀释,将5 ?L的样本转移到495 ?L的1X稀释液中。这会给您1/100的稀释度。接下来,将1/100的稀释液通过将4 ?L转移到796 ?L的1X稀释液中进行稀释。这会给您1/20,000的稀释度。在每个阶段都要彻底混合。
试剂准备
- 使用前将所有试剂置于室温(16°C至25°C)。
- 稀释液浓缩液 - 所提供的稀释液是5倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水(1份缓冲液浓缩液,4份dH2O)稀释1/5。
- 洗涤液浓缩液 - 所提供的洗涤液是20倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水(1份缓冲液浓缩液,19份dH2O)稀释1/20。当储存温度较低时,浓缩液中可能会形成晶体。在稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解晶体。
- 酶-抗体结合物 - 通过将10 ?L酶-抗体结合物加入990 ?L的1X稀释液中,为每个微孔板测试条计算所需的工作结合物溶液量。使用前立即稀释,并避免光照。均匀混合,但要轻柔。避免产生泡沫。
- 预涂层ELISA微孔板 - 按提供的状态即可使用。揭开铝箔袋,从袋中取出板。移除测试中不会使用的条和孔,并将它们连同干燥剂一起重新密封回袋中。
- 牛IgM校准品 - 根据批次特定的分析证书进行准备。
Biogradetech成立于2015年,总部位于美国加利福尼亚州,早期以产品技术研发服务起家,逐步发展了广泛的产品线,并将其商业化销售,包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。适用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域。
微信扫码在线客服