酮体,作为脂肪酸代谢的产物,在多种生理和病理状态下发挥着重要作用。酮体水平的异常升高通常与糖尿病、饥饿、低碳水化合物饮食以及某些遗传性代谢疾病相关。因此,准确测定酮体水平对于诊断和监测相关疾病至关重要。酮体比色测定试剂盒作为一种实验室工具,提供了一种快速、简便、准确的酮体检测方法。
Biogradetech酮体比色测定试剂盒的原理:
酮体比色测定试剂盒通常基于酶联免疫吸附测定(ELISA)或其他比色法原理,通过特定的酶作用将酮体转化为可检测的颜色变化。试剂盒内的酶特异性地催化酮体与试剂中的其他成分反应,产生颜色变化,其强度与样本中酮体的浓度成正比。通过光度计测定吸光度,可以定量分析样本中的酮体含量。
艾美捷酮体比色测定试剂盒(BGT-KAT-200)提供了一种简单、可重复和灵敏的工具,用于测量血浆、血清、尿液、细胞裂解物或组织匀浆中的β-HB水平。β-HB的测定方法基于3-羟基丁酸脱氢酶将D-3-羟基丁酸氧化为乙酰乙酸盐。16伴随着这种氧化,辅因子NAD+被还原为NADH。在黄递酶的存在下,NADH与比色检测器WST-1反应,产生吸收Z大值为445-455nm的甲赞染料。染料的吸光度与β-HB浓度成正比。
试剂盒的组成:
一个完整的酮体比色测定试剂盒包括:
酶标抗体或酶标记的酮体结合蛋白
底物溶液,用于与酮体反应产生颜色变化
标准品,用于建立标准曲线
校准缓冲液和其他必要的试剂
详细的操作说明书
样本准备:
血浆和血清中的β-HB浓度可以在相当宽的范围内变化,正常水平测量为0.02-1.5 mM,在糖尿病患者中可增加至高达3-5 mM。在糖尿病酮症酸中毒期间,尿液中的β-HB浓度可能高达30-50 mM。
血浆:
1. 使用肝素、EDTA或柠檬酸盐等抗凝剂采集血液。
2. 将血液在4°C下以700-1,000 x g的速度离心10分钟。用移液管取上层黄色血浆层,不要扰动白色纤维层。将血浆存放在冰上。如果不在同一天进行检测,则在-80°C下冷冻。血浆样本在-80°C下储存时可稳定一个月。
3. 在检测前应通过10 kDa MWCO离心过滤器(遵循制造商的协议)对血浆进行过滤。
血清:
1. 无需使用抗凝剂采集血液。
2. 让血液在25°C下凝固30分钟。
3. 将血液在4°C下以2,000 x g的速度离心15分钟。用移液管取上层黄色血清层,不要扰动白色纤维层。将血清存放在冰上。如果不在同一天进行检测,则在-80°C下冷冻。血清样本在-80°C下储存时可稳定一个月。
4. 在检测前应通过10 kDa MWCO离心过滤器(遵循制造商的协议)对血清进行过滤。
尿液:
尿液的收集不需要任何特殊处理。如果不在同一天进行检测,则在-80°C下冷冻。
建议使用Cayman的肌酸酐ELISA试剂盒(货号502330)、肌酸酐(尿液)比色法检测试剂盒(货号500701)或类似的检测方法,将从尿液样本中获得的值标准化为肌酸酐水平。
β-羟丁酸荧光测定试剂盒与β-羟丁酸比色试剂盒的相关性测量:在6个血浆样本中,使用β-羟丁酸荧光测定试剂盒和β-羟丁酸比色试剂盒测量了内源性和添加的β-HB,以进行比较。
酮体比色测定试剂盒应用领域:
酮体比色测定试剂盒广泛应用于:
医学研究:研究酮体在疾病发展中的作用。
临床诊断:辅助诊断糖尿病酮症酸中毒、酮症以及其他代谢性疾病。
健康管理:监测低碳水化合物饮食或生酮饮食的效果。
药物监测:评估影响酮体代谢的药物疗效。
酮体比色测定试剂盒部分文献参考:
1. Taggart, A.K.P., Kero, J., Gan, X., et al. J. Biol. Chem. 280(29), 26649-26652(2005).
2. McMurray, C.H., Blanchflower, W.J., and Rice, D.A. Clin. Chem. 30(3),421-425 (1984).
3. Hansen, J.L. and Freier, E.F. Clin. Chem. 24(3), 475-479 (1978).
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