BRD4 (BD1) TR-FRET检测试剂盒，药物发现和高通量小分子抑制剂筛选

BRD4 (BD1) TR-FRET检测试剂盒，药物发现和高通量小分子抑制剂筛选

组蛋白赖氨酸残基的乙酰化在基因的调控过程中扮演着重要角色.被识别的赖氨酸残基的乙酰化位点就是已知的布罗莫结构域，这些结构能调控乙酰化核酸，因此可以控制染色体的结构和基因的表达.BET家族蛋白含有一系列的布罗莫结构域和一个外末端结构域，包括BRD2，BRD3，BRD4和BRDT.BRD2和BRD4能绑定乙酰化组蛋白的尾巴，调节目的蛋白的表达.布罗莫结构域的小分子抑制剂能有效的治疗人类疾病.

BRD4（BD1）TR-FRET检测试剂盒旨在以均匀的384反应形式测量BRD4（BD 1）与其底物结合的抑制作用。这种基于FRET的检测不需要耗时的洗涤步骤，使其特别适合高通量筛选应用。测定程序简单明了；将含有铽标记供体、染料标记受体、BRD4、底物和抑制剂的样品温育60分钟。然后，使用荧光阅读器测量荧光强度。

艾美捷BRD4 (BD1) TR-FRET检测试剂盒（BPS-32613）组成：

Component Amount Storage

BRD4,BD1(49-170) 5μg -80℃

BET Bromodomain Ligand 50μ -80°℃

Non-acetylated Ligand 1 15μl -80℃

Tb donor 2x10μl -20℃

Dye-labeled acceptor 2x10μ -20℃

3x BRD TR-FRET Assay Buffer 1 4 ml -20℃

White,nonbinding,low volume,microtiter plate 1  Roomtemp.

材料或仪器需求但未提供：能够测量时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）的荧光微孔板阅读器。可调节的微量移液器和无菌吸头。

应用：非常适合用于药物发现和高通量筛选（HTS）应用中的小分子抑制剂筛选。

稳定性：按照指示存储时，从收到之日起至少6个月。

参考文献：Filippakopoulos, P., 等人，Cell 2012; 149:214。

检测协议：所有样品和对照应成对测试。

BRD4 (BD1) 检测的协议：

将3倍BRD TR-FRET检测缓冲液1与2倍蒸馏水混合稀释（3倍稀释），制备1倍BRD TR-FRET检测缓冲液1。只制备检测所需的足够量；将剩余的储备溶液分装后在-20°C下储存。

将Tb标记的供体和染料标记的受体在1倍BRD TR-FRET检测缓冲液1中稀释100倍。只制备检测所需的足够量；将剩余的储备溶液分装后在-20°C下储存。

向标记为“测试抑制剂”、“阴性对照”和“阳性对照”的每个孔中分别加入5 ?l稀释后的Tb标记的供体和5 ?l稀释后的染料标记的受体。

向标记为“测试抑制剂”的每个孔中加入2 ?l抑制剂溶液。向标记为“阴性对照”和“阳性对照”的孔中加入2 ?l相同溶液但不含有抑制剂（抑制剂缓冲液）。

BRD4 (BD1) TR-FRET检测试剂盒化验结果示例：

JQ1（BPS Cat.#24701）对BRD4（BD1）的抑制作用，使用BPS Bioscience#32613的BRD4（BD 1）TR FRET检测试剂盒进行测量。所示数据是特定批次的。

文献参考：

Filippakopoulos, P., et al., Cell 2012; 149:214.

BRD4 (BD1) TR-FRET检测试剂盒相关产品：

Product     Name  Catalog Size

BET Bromodomain Ligand  33000  0.5mL

Bromodomain    Non-acetylated Ligand 133005  0.5mL

BRD1(561-668),His-tag  31010  100μg

BRD2(65-187),His-tag  31022  100μg

BRD2(339-459),His-tag  31020  100μg

BRD2      (65-459),His-tag  31025  100μg

BRD3(29-145),His-tag  31030  100μg

BRD3(306-417),His-tag  31031  100μg

BRD4(49-460),His-tag  31045  100μg

BRD4(49-170),His-tag  31042  100μg

BRD4(342-460),His-tag  31043  100μg

BRD1 Inhibitor Screening Kit  32521  384 pxns

BRD2(BD2)Inhibitor   Screening Kit 32522  384 rxns

BRD3(BD1)Inhibitor   Screening Kit 32513  384  rxns

BRD3(BD2)Inhibitor   Screening Kit 32523  384  rxns

BRD4(BD1)Inhibitor   Screening Kit 32514  384 rxns.

BRD4(BD2)InhibitorScreening Kit 32524  384  rxns

(+)-JQ1 Inhibitor  27401  1   mg