艾美捷牛活化蛋白C（BCAPC-1080）解决方案

牛活化蛋白C背景：

活化蛋白C(APC)是一种抗凝血丝氨酸蛋白酶，来源于双链维生素K依赖性酶原蛋白C。α-凝血酶和凝血调节蛋白之间的复合物催化蛋白C重链中Arg-12（牛中的 Arg-14）的单次切割，以生成APC。几种非生理相关的蛋白酶，如RVV-X激活剂、胰蛋白酶和PROTAC也能够激活蛋白C。APC作为抗凝剂起作用，催化辅助因子、因子Va和VIIIa的蛋白水解失活，从而抑制凝血酶原和Xase因子复合物。因子 Va和VIIIa的失活依赖于Ca2+和磷脂。维生素K依赖性辅助因子蛋白S通过与APC形成1:1复合物(Kd=6x10-9M)适度增加这种失活率。有几个因素会减弱 APC 的抗凝血活性。因子Xa通过竞争因子Va上的相似结合位点来保护因子Va免受APC的蛋白水解作用。凝血酶也被提议通过蛋白S的蛋白水解失活来调节 APC。依赖性蛋白C抑制剂 (PAI-3)、循环肝素非依赖性蛋白C抑制剂、血小板衍生蛋白C抑制剂和PAI-1。据报道，APC与两种类型的 PAI之间形成的复合物可解释输注APC或体内APC生成时观察到的纤维蛋白溶解增加。也可以使用氯甲基酮。活化的C蛋白是通过用凝血酶活化然后通过离子交换层析从纯化的C蛋白制备的。APC以50%（体积/体积）甘油/水的形式提供，应储存在-20°C下。通过 SDS-PAGE 分析确定纯度，并使用显色底物测定法测量活性。根据APC抗性测定的要求，还测试了所有 APC 生产批次延长正常人血浆 aPTT 的能力。该测试的结果以aPTT (+/- APC)比率(10nM APC) 的形式提供给每批次。

艾美捷牛活化蛋白C#BCAPC-1080参数：

本地化：等离子

作用方式：抗凝，灭活因子Va和VIIIa

分子量：56200（人）（5）

52650（牛）（5）

56200（鼠）-根据人类价值推断

消光系数：E1 cm，280 nm=14.5（人）（5）

=13.7（牛）（5）

=14.5（鼠）-根据人类价值推断

等电点：4.4-4.8（人）（9）

4.2-4.5（牛）（9）

结构：两条链，Mr=35000和21000，二硫键连接，

NH2-末端gla结构域两个EGF结构域

碳水化合物百分比：23%（人体）（5）

14%（牛）（5）

翻译后修饰：11个gla残基（牛），

一种β-羟基天冬氨酸

免费荧光基质：HTI目录号SN-54和SN-59

牛活化蛋白C文献参考：

1 .  Kalafatis, M ., and Mann, K .G ., J . Biol . Chem ., 268, 27246 (1993) .

2 .  Kalafatis, M ., et al., J . Biol . Chem ., 269, 31869 (1994) .

3 .  Esmon, C .T ., Progress in Thromb . and Hemostas ., 10, 25 (1984) .

4 .  Esmon, C .T ., J . Biol . Chem ., 264, 4743 (1989) .

5 .  Kisiel, W ., et al., Methods Enzymol ., 80, 320 (1981) .

6 .  Stenflo, J ., Semin . in Thromb . and Hemostas ., 10, 109 (1984) .

7 .  Marlar, R .A ., Semin . in Thromb . and Hemostas ., 11, 387 (1985) .

8 .  Walker, F .J ., et al., J . Biol . Chem ., 256, 11128 (1981) .

9 .  Discipio, R .G ., et al., Biochemistry, 18, 899 (1979) .

10 . Dahlback, B ., and Hildebrand, B ., Proc . Natl . Acad . Sci . USA, 91, 1396 (1994) .

11 .  Svensson, P .J ., and Dahlback, B ., New Engl . J . Med ., 330, 517 (1994) .

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