5-AMP活化蛋白激酶(AMPK)是细胞内能量平衡的关键传感器。AMPK 被激活以响应 AMP/ATP 比率的增加,这可能是由许多因素引起的,例如肌肉收缩、饥饿或缺氧。AMPK是一种异源三聚体蛋白复合物,由α-(63 kDa)、β-(38 kDa)和β-(38 kDa)亚基组成。对于每个亚基,已经鉴定出亚型(alpha1,alpha2,1,2,1,2,3),理论上允许形成12种不同的蛋白质。α亚基含有丝氨酸/苏氨酸激酶结构域,调节亚基含有AMP和ATP(β亚基)和糖原(β亚基)的结合位点。AMPK在催化域内通过Thr-172上的磷酸化被激活。与基础水平相比,AMP 结合导致 AMPK 活性增加 2 至 5 倍。AMP 与 β 亚基的结合导致激酶的变构活化并诱导激酶结构域的构象变化,从而保护 AMPK 免受 Thr-172 的去磷酸化。
Genie 基于细胞的检测 ELISA 可测量整个细胞中的磷酸化 AMPK,并将信号标准化为总蛋白质含量。该抗体可识别α亚基,因此可用于来自所有组织(人,小鼠,大鼠)的细胞。这种简单有效的检测方法无需细胞裂解物制备,可用于研究短期和长期检测中的 AMPK 调控。在该测定中,在96孔板中生长的细胞在孔中固定并透化。使用荧光ELISA测量AMPK磷酸化(pAMPK),然后在每个孔中测量总蛋白。用于培养细胞中AMPK磷酸化状态的定量荧光免疫酶测定。
作为Assay Genie全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Assay Genie热销产品人 TAF10 重组蛋白 (RPPB2302)。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
人 TAF10 重组蛋白 (RPPB2302) | BA0075 | 查看 |
人 TAF10 重组蛋白 (RPPB2302):
套件包括 | 10x 洗涤缓冲液:25 mL 封闭缓冲液:25 mL 蛋白染色剂:6 mL HRP 底物:6 mL pAMPK-Ab1 10 uL HRP-Ab2 10 uL |
套件要求 | 37%甲醛,3%H 2 O 2,黑色(透明底部)细胞培养96孔板,板封口剂:去离子水或蒸馏水;移液装置;细胞培养箱;离心管;荧光酶标仪能够在EX/EM = 530/585nm和EX/EM = 360/450nm下读取 |
检测方法 | FL360/450纳米, 530/585纳米 |
样品 | 细胞、组织等 |
物种 | 人、老鼠、大鼠 |
协议长度 | 8 小时 |
大小 | 100 次测试 |
存储 | 将所有试剂储存在 -20°C |
保质期 | 6个月 |
特色:
灵敏。可以在低至 500 个细胞/孔中测量 pAMPK 调制。
简单方便。无需细胞裂解,细胞可培养数天。
Assay Genie旗下涵盖了15种种属的高品质的ELISA试剂盒及多种抗体,可检测的指标种类丰富,覆盖免疫、代谢和分子等多种研究领域,是科学研究中便捷的小助手。
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