ImmunoChemistry流式细胞仪轻松监测活细胞自噬方案

细胞自噬（autophagy）是一种由溶酶体介导的降解过程，细胞通过形成具有双层膜囊状结的自噬体，包裹细胞质的一部分，并运送到溶酶体，进行降解及回收利用。正常情况下细胞内的自噬水平较低，在饥饿或应激时可迅速上调。这种降解活动有助于在生物能量需求升高期间提供营养物质(氨基酸、核苷酸、脂肪酸等)和能量。自噬的另一个功能是协助检测和破坏细胞内病原体(病毒、细菌和寄生虫)。自噬失调与许多疾病有关，包括癌症、感染和退行性疾病。  

细胞自噬是一个动态过程，通常分为三个阶段: 在第一阶段，需要被降解的细胞质组分被隔离在双膜自噬体内，在第二阶段，自噬体与溶酶体融合形成自噬溶酶体或自溶酶体，在第三阶段，自噬体内容物发生降解。   

美国ICT提供的自噬检测试剂盒使研究人员能够在体外检测和监测活细胞自噬。试剂盒中的红色自噬探针是一种可以穿透细胞的脂肪族分子，当插入自噬体和自溶酶体的脂膜时发出明亮的荧光。该红色自噬探针可以通过流式细胞仪检测。

* 仅供科研使用，不得用于医疗. 

采用ICT的自噬检测试剂盒（货号9156、9157）检测Jurkat细胞的自噬水平。用0.5?M雷帕霉素(橙色)、10?M氯喹(蓝色)或同时用0.5?M雷帕霉素和10?M氯喹(红色)处理细胞18小时。自噬探针Red染色60 min后洗涤细胞，采用流式细胞仪(配备绿/黄激光(561 nm激发)和610/20发射型滤光片)进行分析。直方图的叠加显示在右边。显示中位数荧光信号、%阴性和%阳性细胞的表如上所示。雷帕霉素或氯喹处理后与未处理的对照组相比荧光信号增强。雷帕霉素和氯喹联合处理后，荧光信号进一步增强。   

【文章鉴赏】 Evaluation of the Anticancer Activities of Novel Transition Metal Complexes with Berenil and Nitroimidazole. Molecules. 2020 Jun 21;25(12):2860

美国ICT除了可提供全面的细胞活性检测相关试剂，包括凋亡、 caspase、 自噬、细胞毒性、坏死等相关检测，还可以同时提供高质量高灵敏度的 ELISA以及相关试剂，包括包被液、封闭液、冲洗液、底物、终止液、板子等等。    

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