Biosensis示踪试剂--可视化神经退行性疾病的发展路径！

Biosensis提供多种已建立且经过良好特性化的追踪试剂，用于检测退化的神经元（Fluoro-Jade B和C）、淀粉样斑块（Amylo-Glo和HQ-O）以及正常和病理性髓鞘（Black Gold II）。这些染色试剂是卓越的研究工具，提供了最大的灵活性，以研究神经退行性疾病的途径和疾病修饰药物。

Biosensis追踪试剂展示出几个关键优势：

△在高影响力期刊上发表丰富——质量由您的同行验证

△详细的协议——保证易于使用的试剂有效

△卓越的技术支持——确保您的实验成功

△灵活性——与各种组织类型、染色技术和现有的抗体免疫染色协议兼容

用荧光玉B和C识别退化神经元

神经元退化的原因和影响引起了众多神经科学家的极大兴趣。与这种兴趣并行的是越来越多的适用于检测神经元退化的方法。荧光玉B（FJB）和C（FJC）示踪试剂对所有退化的神经元进行染色，无论其受到何种损伤或细胞死亡机制。

左图：老年糖尿病大鼠海马CA3区退化神经元的Fluoro-Jade C（FJC）染色（绿色）。蓝色：DAPI核染色。图片由王博士及其同事提供（Wang S. et al. (2020)）。

右图：使用结合蓝色和紫外线上荧光照明的双重曝光，展示了暴露于卡因酸的大鼠扣带回皮层表层。第一层含有明显的Fluoro-Jade C阳性退化轴突末梢。第二层含有密集的DAPI阳性存活颗粒细胞。第三层含有FJC阳性退化锥体细胞和DAPI阳性存活锥体细胞的混合。照片由Larry Schmued博士提供。

FJC展现出最高的信噪比和最高的分辨率。这意味着它对退化神经元的染色具有最大的对比度和亲和力，使其成为定位不仅退化的神经细胞体，还有远端树突、轴突和末梢的理想选择。该染料对褪色高度抵抗，并且与几乎所有的组织学处理和染色协议兼容。

荧光染料Fluoro-Jade B（FJB），与其更纯净的兄弟FJC一样，是一种阴离子荧光素衍生物，适用于正在退化的神经元的组织学染色。FJB与FJC的不同之处在于，它是一种稍欠精炼的化学配方，因此它不提供与FJC相同的信噪比或高分辨率。尽管如此，FJB仍然被广泛使用，并且作为退化神经元甚至胶质细胞的标记物效果非常好（见Damjanac M et al., 2007）。FJB的操作协议与FJC几乎相同，并且FJB与包括免疫荧光和荧光尼氏技术在内的几种其他标记程序兼容。

Biosensis Fluoro-Jade B和C追踪试剂提供以下规格：

注意：TR-150-FJ 相当于 Merck-Millipore 的停产产品 AG310，R-160-FJ相当于 Merck-Millipore 的停产产品 AG325。

使用Amylo-Glo和HQ-O识别淀粉样斑块

Amylo-Glo即用型（RTD）染色试剂（TR-300-AG）旨在对组织切片中的淀粉样斑块进行染色。由于其独特的化学和光谱特性，这种标记物比其它传统标记物如Thioflavin S和Congo Red具有多个优势（Schmued L et al., 2012）。使用Amylo-Glo在生理条件下会产生非常明亮的蓝色紫外线激发染色，在使用其他滤光片照明时不会发生渗色。其亮度使其非常适合低放大倍数的定量研究，而其独特的激发/发射特性和温和的染色条件使其非常适合用于多重免疫荧光标记研究。Amylo-Glo RTD与新鲜、冷冻和福尔马林固定的免疫组化或免疫细胞化学兼容，并且由于其高荧光强度、高抗光漂白性和紫外线通道荧光的独特特性，特别适合共聚焦和多重标记。

左图：三重曝光允许在AD/Tg小鼠海马中同时定位Amylo-Glo阳性淀粉样斑块（蓝色）、GFAP阳性肥大的星形胶质细胞（绿色）和活化的小胶质细胞（红色）。结合紫外线、蓝光和绿光照明。

右图：在AD/Tg小鼠海马的齿状回区域，Amylo-Glo标记淀粉样斑块（蓝色）与乙二胺溴化物尼氏（细胞体）对比染色（红色）。

Biosensis Amylo-Glo RTD淀粉样斑块染色试剂与EtBr对比染色（TR-400-AG）试剂盒利用乙二胺溴化物对比染色，快速有效地可视化细胞核和细胞体，同时在紫外线照明下允许一步评估淀粉样斑块和细胞/组织定位。

HQ-O即用型（RTD）追踪试剂旨在标记石蜡包埋或新鲜切割的冷冻组织切片中的淀粉样斑块。作为一种荧光锌螯合剂，HQ-O是独特的，因为它利用了已知的淀粉样斑块中浓缩锌的存在。HQ-O的研究表明，只有在锌的存在下合成的Aβx-42聚集时才会看到类似斑块的荧光结构。在蓝光激发下，脑实质中的斑块结构呈现出鲜绿色荧光，与Aβ抗体染色后观察到的斑块结构密切相关。HQ-O RTD染色试剂与其它荧光团兼容，如DAPI、Hoechst和乙二胺溴化物，以及在荧光显微镜的蓝色和/或红色发射范围内具有发射光谱的荧光标记抗体。由于其锌螯合特性，HQ-O RTD染色试剂可能会可视化血管内的小球状结构和血管内白细胞。

 D：在海马CA4区域，使用GFAP抗体共标记展示了肥大的星形胶质细胞（橙色）与它们通常包围的淀粉样斑块（绿色）之间的关系。GFAP免疫反应性用TRITC荧光团可视化。E：在患有阿尔茨海默病的人类皮层中可以看到三个淀粉样斑块（绿色）。F：人类AD患者的皮层中血管斑块的一个例子。

HQ-O即用型（RTD）染色试剂相比旧的蓝光激发染色剂如Thioflavin S具有多个优势：

△HQ-O通过其独特的锌结合特性，独立于构象确认地结合到淀粉样纤维和斑块上

△与Thioflavin S、Thioflavin T和Congo Red相比，展现出更大的对比度和分辨率

△具有紧密的激发和发射光谱，没有激发的渗色，容易进行清晰的多重标记研究

△使用常见的蓝光（FITC荧光）滤光片（Emax 475 nm）

△与福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）和冷冻组织切片兼容

△比其他任何非紫外线淀粉样染色剂更容易使用、更清晰、更明亮！

Biosensis 淀粉样蛋白噬菌斑示踪试剂有以下规格可供选择：

识别正常和病理性髓鞘的Black-Gold II

Black-Gold II是一种卤代磷酸金复合物，它可以在中枢神经系统内定位髓鞘。Black Gold II即用型（RTD）染色试剂盒允许定位髓鞘，包括单个纤维和纤维束，同时可以选择通过甲苯胺蓝对比染色共定位细胞体。在明场照明下，Black Gold II标记的有髓纤维几乎呈黑色，而甲苯胺蓝O标记的细胞尼氏体呈蓝色。

Black Gold II能够展示和表征与多种神经毒素暴露相关的特定髓鞘变化，包括 kainac酸、domoic酸、3-硝基丙酸、Fluoro-Gold和isoniazid。Black Gold II还可以与其他组织化学标记物结合使用，包括尼氏体染色、逆行转运的荧光示踪剂和神经元变性的荧光标记物。与Black-Gold II相关的优势包括高分辨率、高对比度、短暂的组织化学处理时间、多功能性和一致的可重复性。

左图：8个月大的Ad-Tg小鼠海马的明场照明（60倍）。可以在淀粉样斑块内外观察到髓鞘病理。相邻颗粒细胞和多形细胞的细胞体呈蓝色，而单个有髓纤维几乎呈黑色。照片由L. Schmued博士提供。

右图：人类脑干下丘脑的钙调蛋白基因相关肽样免疫反应性（黑色）和髓鞘染色（红色，Black-Gold II染色试剂盒，Biosensis），显示了背柱核下丘脑和三叉神经脊状体的类似的神经化学和结构组织（Del Fiacco M. et al., 2018）。

Biosensis正常和致病性髓鞘示踪试剂有以下大小可供选择：