Jackson-Alexa Fluor 555和568免疫荧光实验方案

Jackson专业从事亲和纯化的二抗和纯化免疫球蛋白，其产品主要销往到各地的大学科研所和医院里的动物研究以及生物医学研究机构的科学家。

目前艾美捷Jackson全新推出Alexa Fluor 555和Alexa Fluor 568偶联物。

Jackson现提供Alexa Fluor 555和568二抗偶联物。随着橙色通道新增的两个选择，组合设计变得更加简便。本文将会用案例展示JIR Alexa Fluor 偶联物的实用性。

Jackson-Alexa Fluor 555和568应用：

用于检测马来酰亚胺功能基团。

Jackson-Alexa Fluor 555和568关键特点：

准备和检测时间少于1小时。快速且易于使用

当开发针对多个靶标的免疫荧光实验时，一系列光谱上不同的荧光染料和经过交叉吸附处理以减少与其他物种反应的二抗对于每个靶标特异性检测和明确结果至关重要。

明亮且易于使用的Alexa Fluor 染料偶联的二抗，现在新增了两种新的偶联物：Alexa Fluor  555和568。这两种新染料补充了我们现有的Alexa Fluor 偶联二抗系列，为橙色通道提供了两个新的选择。

除了全光谱范围的荧光染料，Jackson免疫研究公司的Alexa Fluor 偶联二抗还提供广泛的靶标特异性。它们与驴或山羊宿主二抗偶联，这些宿主二抗对许多常见物种的交叉反应性最小，以避免多个一抗之间的串扰。

在这里，我们展示了如何将Alexa Fluor  555或568结合到您的四色免疫荧光实验中。

使用DAPI、Alexa Fluor  488、Alexa Fluor  555、Alexa Fluor  647的四色免疫荧光

这个组合中三种Alexa Fluor 染料的光谱特性（图1），允许它们与DAPI核染色结合，实现有效的四色免疫荧光。我们通过染色人类上皮细胞（HEp-2细胞）以常见的细胞内蛋白标记物来展示这种荧光团组合。Ki-67蛋白，细胞增殖的标记物（Scholzen和Gerdes., 2000），可以看到呈绿色。细胞骨架结构的方面可以看到呈黄色，通过使用抗α微管蛋白染色微管来可视化。Cis-Golgi基质蛋白，参与高尔基体囊泡的堆叠和维持高尔基体结构（Chang等人，2012），使用抗人GM130/GOLGA2进行可视化，可以在核边缘看到呈红色。核被DAPI染色，可以看到呈蓝色。（图2）。

图1：四色免疫荧光DAPI、Alexa Fluor? 488、Alexa Fluor? 555、Alexa Fluor? 647的光谱及激发和发射细节。

图2：人类上皮细胞（HEp-2细胞）的间接四色免疫染色。使用兔抗Ki-67抗体后跟Alexa Fluor? 488偶联的驴抗兔IgG（H+L）（711-545-152），细胞增殖以绿色显示。使用鼠抗α微管蛋白后跟Alexa Fluor? 555偶联的驴抗鼠IgG（H+L）（715-565-150），微管以黄色显示。使用羊抗人GM130/GOLGA2后跟Alexa Fluor? 647偶联的驴抗羊IgG（H+L）（713-605-147），高尔基结构以红色显示。蓝色 - DAPI核染色。

Jackson-Alexa Fluor 555和568文献参考：

Chang, S. H., Hong, S. H., Jiang, H. L., Minai-Tehrani, A., Yu, K. N., Lee, J. H., Kim, J. E., Shin, J. Y., Kang, B., Park, S., Han, K., Chae, C., & Cho, M. H. (2012). GOLGA2/GM130, Cis-Golgi matrix protein, is a novel target of anticancer gene therapy. Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy, 20(11), 2052–2063.

Scholzen, T., & Gerdes, J. (2000). The Ki-67 protein: from the known and the unknown. Journal of cellular physiology, 182(3), 311–322.