Worthington：手动腺苷脱氨酶的应用及特异性分析

腺苷脱氨酶催化2'-脱氧腺苷和腺苷不可逆地脱氨基为脱氧肌苷和肌苷。它存在于各种不同形式的原核生物和真核生物中（Pospisilova和Frebort 2007）。

特异性：

腺苷脱氨酶已经进化到作用于腺苷及其衍生物（Sharoyan等人，2006年）。此外，腺苷脱氨酶还作用于非肽键的碳氮键，例如在环状酰胺中（White和White，1997年）。

组成：

腺苷脱氨酶具有（beta/alpha）8桶状结构基序，并在催化口袋中包含一个锌原子。需要一个单独的二价阳离子（锌或钴）来催化活性（Cristalli等人，2001年）。

分子特征：

在高等真核生物中，两种不同的同工酶由不同的基因编码（Maier等人，2005年）。在人类中，ADA1是一种单链Zn结合蛋白，几乎所有活性都归因于这种蛋白。ADA2被认为由单核细胞产生，并且含量可以忽略不计。ADA1基因的突变，其中表达被阻断，会导致免疫缺陷，而那些导致过表达的突变则会导致溶血性贫血（Pospisilova和Frebort，2007年）。

该酶在系统发育上分布广泛，其序列从细菌到人类都高度保守（Chang，1991年）。低等真核生物的基因不包含内含子，而哺乳动物ADA基因中95%的DNA序列被内含子占据（Pospisilova和Frebort，2007年）。已经报告了牛、小鼠、人类、大肠杆菌、酿酒酵母和链霉菌的基因序列。哺乳动物中活性位点周围的氨基酸残基高度保守（Cristalli等人，2001年）。人类和牛的腺苷脱氨酶的相似性为93%（Kelly等人，1996年），人类和小鼠的腺苷脱氨酶的相似性为83%（Wiginton等人，1984年，Daddona等人，1984年，和Yeung等人，1985年）。细菌酶与哺乳动物腺苷脱氨酶的相似性为33%（Kelly等人，1996年）。

艾美捷Worthington手动腺苷脱氨酶：

类别：Alpha Beta

架构：Alpha-Beta桶

拓扑结构：TIM桶

分子质量：

40.8 kDa（理论值）

最佳pH值：5.0-9.0（Rossi和Lucacchini，1974年）

等电点：5.33（理论值）

消光系数：43,960 cm-1 M-1

活性位点残基：

组氨酸（H214）

半胱氨酸（C262）

天冬氨酸（D295和D296）

激活剂：Zn2+

抑制剂：Ag+、Hg2+、Cu2+

TPCK、DFP

应用：

提高水平是多种人类疾病的诊断测试（Ribera等人，1987年，和Segura等人，1989年）。

肌苷、脱氧肌苷和二脱氧肌苷的合成（Sheid，1996年）

在生物液体中测定腺苷（Piras，1973年）

血液中5'-核苷酸酶的测定（Blackburn等人，1992年）

文献参考：

Agarwal, R. , Sagar, S. and Parks, R.

Adenosine Deaminase from Human Erythrocytes: Purification and Effects of Adenosine Analogs , Biochem Pharmacol 24 , 693 , 1975

Aiuti, A. , Cattaneo, F. , Galimberti, S. , Benninghoff, U. , Cassani, B. , Callegaro, L. , Scaramuzza, S. , Andolfi, G. , Mirolo, M. , Brigida, I. , Tabucchi, A. , Carlucci, F. , Eibl, M. and Aker, M.

Gene Therapy for Immunodeficiency Due to Adenosine Deaminase Deficiency , N Engl J Med 360 , 447 , 2009

Akedo, H. , Nishihara, H. , Shinkai, K. , Komatsu, K. and Ishikawa, S.

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Andy, R. and Kornfeld, R.

Biosynthesis of the Adenosine Deaminase-binding Protein in Human Fibroblasts and Hepatoma Cells , J Biol Chem 259 , 9832 , 1984

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