Psb27-H1(光系统II修复蛋白27)参与光损伤光系统II(PSII)的修复。定位于叶绿体内腔,参与细胞对光强度的反应。别名:类囊体内腔蛋白PSB27-H1。
艾美捷抗Psb27-H1 |光系统II修复蛋白27:
货号:AS22-4788
免疫原:来自拟南芥(Arabidopsis thaliana)PSB27-H1蛋白序列的KLH偶联肽,UniProt: Q9LR64, TAIR: At1g03600
宿主:家兔
克隆性:多克隆
纯度:抗原亲和纯化血清,PBS pH 7.4
格式:冻干
数量:50微克
复溶:复溶时,加入50微升的无菌或去离子水。
储存:冻干/复溶后储存于-20°C;一旦复溶,请分装成小份以避免反复冻融循环。请在打开管子之前短暂离心,以避免因冻干材料粘附在管盖或管壁上而造成的损失。
测试应用:Western blot (WB)
推荐稀释度:1:1000 (WB)
预期/表观分子量:18.8 | 11.7 | 千道尔顿(由于末端处理)
确认的反应性:拟南芥(Arabidopsis thaliana)
预测的反应性:甘蓝(Brassica oleracea)、白菜(Brassica rapa)、荠菜(Capsella rubella)、咖啡(Coffea arabica)、茶树(Camellia sinensis)、南瓜(Cucurbita pepo subsp. pepo)、猩红丽穗(Erythranthe guttata)、棉花(Gossypium hirsutum)、橡胶树(Hevea brasiliensis)、石榴(Hibiscus syriacus)、桑树(Morus notabilis)、白杨(Populus alba)、毛果杨(Populus trichocarpa)、萝卜(Raphanus sativus)、皂皮树(Quillaja saponaria)
不反应于:莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)
附加信息(应用):建议使用新鲜提取的样品进行分析。对于蛋白转移,使用0.2微米孔径的膜以确保蛋白正确转移,如这里所描述。
抗Psb27-H1 |光系统II修复蛋白27应用实例:
大约30-3.75微克/孔的拟南芥(Arabidopsis thaliana)的总类囊体蛋白,这些蛋白是从之前分离的类囊体膜中新鲜提取的(2021/07/30,保存在-80°C)。初始样品缓冲液:20 mM MES-NaOH pH 6.3,5 mM MgCl2,15 mM NaCl。样品用快速样品缓冲液变性:简而言之,对于每个5微升的样品小份,加入3微升Bio-Rad Native Page样品缓冲液货号#161-0738 + 2微升10% SDS + 1微升2% β-巯基乙醇),在70°C下处理5分钟。样品在4-20% SDS-PAGE上分离,并在45分钟内转移到硝酸纤维素膜上,使用半干转移。膜片用5%牛奶封闭:1小时/室温下带搅拌。膜片在1:1000稀释的一抗中孵育,TBS-T中含5%牛奶,过夜/4°C带搅拌。倒掉抗体溶液,膜片短暂冲洗两次,然后在室温下用TBS-T带搅拌分别孵育15分钟和3次5分钟。膜片在1:25000稀释的二抗中孵育(山羊抗兔IgG辣根过氧化物酶偶联,AS09 602 Agrisera),在室温下带搅拌1小时30分钟。膜片如上所述进行洗涤,并用以下化学发光检测试剂显影:AgriseraBright(AS16 ECL-N-10)。曝光时间为10分钟。
感谢瑞典于默奥大学化学系博士生André Gra?a提供。
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