LEA(晚期胚胎发生丰富)蛋白质是非常亲水的蛋白质,25年前被描述为在植物种子发育的后期积累。在暴露于环境胁迫后的营养植物组织中发现。
同义词:推测胚胎发生晚期富含LEA蛋白。
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抗LEA 6|晚期胚胎发生丰富蛋白6 | AS21-4596 | 查看 |
抗LEA 6|晚期胚胎发生丰富蛋白6:
免疫原:来自拟南芥LEA6蛋白序列的KLH偶联肽,UniProt: O64820, TAIR: At2g23110, UniProt: Q8S8R1 TAIR: AT2G23120 和 UniProt: O23658, TAIR: AT2G33690
宿主:兔
克隆性:多克隆
纯度:亲和纯化血清,在PBS pH 7.4中
格式:冻干
数量:50 微克
复溶:复溶时加入50 微升无菌或去离子水。
储存:冻干/复溶后储存于-20°C;一旦复溶,请分装以避免反复冻融。请记住,在打开管子前短暂离心以避免由于冻干物质粘附在管盖或管壁上而造成的任何损失。
测试应用:西方印迹(WB)
推荐稀释度:1:1000(WB)
确认反应性:拟南芥(重组LEA6)
不反应于:目前没有已知的预测反应性确认例外
样本:
M - Bio-Rad精确双重颜色蛋白标准
1 - 细菌提取物,4 微升
2 - 纯化的His标签拟南芥LEA 16蛋白,8 微升
样本用SDS DTT样品缓冲液(12 mM Tris pH 6.8, 10% 甘油,0.4% SDS,80 mM DTT,0.02% 溴酚蓝)在室温下变性30分钟,然后分离在12% SDS-PAGE上,并在100 V下湿转移至PVDF膜(孔径0.2 微米),使用湿转移(10 mM CAPS pH 11, 20% MeOH)。用5%牛奶在TBS 0.1% Tween20中封闭1小时/室温下搅拌。用1:1000稀释的初级抗体在TBS 0.1% Tween 20中过夜/4°C下搅拌。倒掉抗体溶液后,短暂冲洗两次,然后在室温下用TBS-T搅拌2次,每次30分钟。用AgriSera匹配的二级抗体(抗兔IgG辣根过氧化物酶偶联)稀释至1:25000,在25 mL的TBS 0.1% Tween20中1小时/室温下搅拌。如上所述洗涤膜,并用Bio-Rad Clarity西部ECL底物显影5分钟。曝光时间为60秒。
注意:表观分子质量(32-34 kDa)是预期(8 kDa)的4倍。这与报告某些LEA蛋白在SDS-PAGE中异常行为的出版物一致。
感谢法国IRHS/Seedling Metabolism & Stress的David Macherel博士提供额外信息(应用):抗体在内源样本中的反应性尚待确定。
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