Agrisera 抗CALS12/PMR 4|胼胝质合成酶12：植物病理学研究的新视角

CALS12/PMR4（胼胝质合酶12）参与孢子体和配子体发育，是正常叶片发育和创伤和病原体攻击诱导的胼胝质形成所必需的。替代名称：1,3-β-葡聚糖合酶，蛋白葡聚糖合成酶样5，蛋白粉MILDEW抗性4。

作为Agrisera全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Agrisera热销产品抗CALS12/PMR 4|胼胝质合成酶12。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

抗CALS12/PMR 4|胼胝质合成酶12：

免疫原：来自拟南芥（Arabidopsis thaliana）CALS12蛋白序列的KLH偶联肽，UniProt: Q9ZT82，TAIR: At4g03550

宿主：兔

克隆性：多克隆

纯度：抗原亲和纯化血清，在PBS pH 7.4中

格式：冻干

数量：50 微克

复溶：复溶时加入50 微升无菌水。

储存：冻干/复溶后储存于-20°C；一旦复溶，请分装以避免反复冻融。请记住，在打开管子前短暂离心以避免由于冻干物质粘附在管盖或管壁上而造成的任何损失。

测试应用：西方印迹（WB）

推荐稀释度：1:1000（WB）

预期|表观分子量：206.9 | 185 kDa

确认反应性：拟南芥

预测反应性：Capsella rubella, Camelina sativa, Eutrema salsugineum, Brassica napus, Brassica oleracea, Brassica rapa, Tarenaya hassleriana

样本：

1: Col-0 – 总蛋白提取物

2: pmr4-1/cals12 – 总蛋白提取物

3: Col-0 – 可溶性蛋白分数（S100）

4: pmr4-1/cals12 – 可溶性蛋白分数（S100）

5: Col-0 – 微粒体蛋白分数（P100/M）

6: pmr4-1/cals12 – 微粒体蛋白分数（P100/M）

从60株拟南芥幼苗（10天大）的Col-0（野生型；第1、3、5条）和pmr4-1/cals12空突变体[参考文献1]（第2、4、6条）中分离出总蛋白。使用差速离心，将总蛋白分数（第1、2条）分离成可溶性蛋白（S100；第3、4条）和微粒体蛋白（M/P100；第5、6条），如我们实验室之前发表的[参考文献2]。蛋白质在65°C下变性5分钟。30微克蛋白质在8% SDS-PAGE上分离，并在55V下使用槽式转移系统转移到硝酸纤维素膜上70分钟。用1x PBS + 0.1% Tween 20（PBS-T）+ 5%牛奶在室温（RT）下搅拌1小时进行封闭。为了测试AgriSera（AS21 4567）的初级α-CalS12/PMR4，使用了图示中指示的不同稀释度的抗体。用α-CNX1/2（AS12 2365，膜ER）和α-MPK6[参考文献1]探测的膜部分作为装载对照。在1x PBS-T + 5%牛奶中，用初级抗体在4°C下搅拌过夜。倒掉初级抗体溶液后，用1x PBS-T在RT下搅拌4次（每次6-8分钟）洗涤膜，然后再用二级抗体山羊抗兔IgG（H&L）-HRP偶联（AS09 602-试验）稀释至1:20,000在1x PBS-T + 5%牛奶中搅拌2小时。如上所述洗涤膜，并用化学发光检测试剂ECL Bright（AS16 ECL-N）显影4分钟。X光胶片的曝光时间在图中指示。

感谢Kelly Mason和Antje Heese；密苏里大学，生物化学系，IPG（美国）

文献参考：

[1] Mason K, Ekanayake G, Heese A (2020). 拟南芥子叶和叶片中callose的染色和自动化图像定量。方法细胞生物学：植物细胞生物学160:181-199。

[2] LaMontagne, E.D., Collins, C.A., Peck, S.C. 和 Heese, A. 2016. 拟南芥微粒体膜蛋白的分离。Curr. Protoc. Plant Biol. 1:217-234. doi: 10.1002/cppb.20020

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