COP1(E3泛素蛋白连接酶COP1)参与蛋白酶体介导的泛素依赖性蛋白质分解代谢过程和蛋白质泛素化。该蛋白含有一个无名指锌结合基序、一个卷曲的螺旋结构域和几个WD-40重复序列,类似于G-β蛋白。在黑暗中充当光形态形成的抑制剂和黄化的激活剂。通过介导光诱导的转录因子如HY5、HYH和LAF1的泛素化和随后的蛋白酶体降解,抑制黑暗中的光形态形成。在黑暗中定位在细胞核中,但在光照后逐渐重新定位到细胞质中。
别名:组成型光形态形成蛋白1,RING型E3泛素转移酶COP1
作为Agrisera全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Agrisera热销产品抗COP1|E3泛素蛋白连接酶COP1。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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抗COP1|E3泛素蛋白连接酶COP1 | AS20-4399 | 查看 |
抗COP1|E3泛素蛋白连接酶COP1:
免疫原:带有His标签的拟南芥COP1蛋白的重组部分,在大肠杆菌中过表达,UniProt编号:P43254,TAIR编号:AT2G32950
宿主:兔子
克隆性:多克隆
纯度:抗原亲和纯化血清,处于pH 7.4的PBS中
格式:冻干
数量:50微克
重组:重组时加入50微升无菌水。
储存:将冻干/重组产品储存在-20°C;一旦重组,制作小份量以避免重复冻融循环。请记得在使用前短暂离心管,以避免由于冻干材料粘附在管盖或管壁上而可能发生的损失。
测试应用:西方印迹(WB)
推荐稀释度:1:1000(WB)
预期/表观分子量:75千道尔顿
确认的反应性:拟南芥
预测的反应性:芸薹属植物(Brassica napus, Brassica rapa)、金亚麻(Camelina sativa)、红石竹(Capsella rubella)、盐生拟南芥(Eutrema salsugineum)、灰毛菜(Hirschfeldia incana)、萝卜(Raphanus sativus)、番茄(Solanum lycopersicum)
样品:
标记:Precision Plus Protein Dual Color Standards(Biorad,编号1610394)
1 - 拟南芥cop1-4突变体
2 - 拟南芥35S-FLAG-GFP-COP1/cop1-4转基因系#1
3 - 拟南芥35S-FLAG-GFP-COP1/cop1-4转基因系#2
从15株幼苗(在短日照条件下生长7天,8小时光照/16小时黑暗)中新鲜提取的总蛋白,使用2倍Laemmli样品缓冲液(Biorad,120 mM Tris-HCl pH 6.8,4% SDS,20% 甘油,0.02% 溴酚蓝,200 mM 二硫苏糖醇),然后在95°C下变性10分钟。蛋白质在预制的SDS-聚丙烯酰胺凝胶上分离,使用7.5%的丙烯酰胺,并通过半干转印转移到硝酸纤维素膜上(Biorad Trans-Blot Turbo RTA Nitrocellulose Transfer Kit),转印时间为7分钟。转印后的膜用EveryBlot Blocking Buffer(Biorad)在室温下封闭10分钟并摇动。将膜在1:1000稀释的抗COP1抗体中于4°C下过夜孵育并摇动。倒掉一抗溶液后,首先短暂洗涤膜一次(5秒),然后洗涤15分钟,接着再进行3次额外的5分钟洗涤,使用1x TBS-T(不含封闭剂)并摇动。将膜在Agrisera匹配的二抗(山羊抗兔IgG,HRP结合,AS09 602)中以1:25000稀释,室温下孵育1小时并摇动。按照上述方法洗涤膜,并使用化学发光检测(AgriseraSuperBright,AS16 ECL-S-10)开发2至3分钟,根据制造商的说明进行。曝光时间为20秒。
Agrisera 公司提供的植物领域的抗体涵盖拟南芥、莱茵衣藻、蓝藻、松柏类、硅藻、大豆、大麦、蒺藜苜蓿、烟草、稻、菜豆、小立碗藓、杨树、豌豆、番茄、马铃薯、菠菜、小麦、玉米、葡萄等多个物种,此外还有水生生物类(藻类、鱼)抗体,细菌、昆虫、真菌抗体。Agrisera 公司以提供高品质、优服务在欧洲树立了优秀的品牌形象,并成为瑞典 Umeå Plant Science Centre的抗体供货商,同时还积极拓展全球市场,每年都有大批采用该公司抗体产品的高质量研究论文发表于各类学术刊物,受到全球科研工作者的一致认可。作为Agrisera在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的Agrisera产品以及客户订制化服务。
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