AgriseraECL SuperBright用于蛋白质印迹检测,是一种高质量的底物,用于在极低的femtogram水平下检测辣根过氧化物酶活性,提供低背景和优异的信噪比。
它是一个即用型2分量系统,具有低背景、优异的信噪比和最高的灵敏度。
该试剂具有极低的毫微微级灵敏度,同时具有低背景和优异的信噪比。
作为Agrisera全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Agrisera热销产品AgriseraECL SuperBright。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
AgriseraECL SuperBright | AS16-ECL-S- | 查看 |
AgriseraECL SuperBright:
数量:
2 x 5毫升,两组分即用型溶液,足够进行5次中号印迹(6.8 x 8.1厘米);2 x 50毫升,两组分即用型溶液,足够进行50次中号印迹(6.8 x 8.1厘米),总计2754平方厘米。
储存:
储存于2°C至8°C。混合工作试剂在室温或4°C下稳定数天。批次间一致性极佳。
在2°C至8°C的暗处储存,保质期为24个月。保持容器紧闭,远离热源或光线。
从拟南芥叶片(1)和大麦叶片(2)中提取了10微克总蛋白,使用蛋白提取缓冲液PEB(AS08 300)。样品用1X样品缓冲液(NuPAGE LDS样品缓冲液(Invitrogen)补充50 mM DTT并在70°C下加热5分钟,然后在加载前保持在冰上。蛋白样品在4-12% Bolt Plus凝胶上分离,LDS-PAGE,并在70分钟内转移到PVDF膜上,使用槽式转移。转移后立即在5%脱脂牛奶中溶解于20 mM Tris、137 mM氯化钠pH 7.6含0.1%(体积比)Tween-20(TBS-T)中,在室温下带搅拌条件下封闭1小时。印迹在Agrisera抗RbcL一抗(AS03 037)中孵化,稀释比例为1:20000。
倒掉抗体溶液,印迹短暂冲洗两次,然后在室温下用TBS-T带搅拌条件下分别洗15分钟和3次5分钟。印迹在二抗(山羊抗兔IgG辣根过氧化物酶偶联,推荐二抗AS09 602,Agrisera)中稀释至1:20000,随后洗涤并使用Agrisera ECL SuperBright检测试剂进行检测。使用CCD成像仪(VersaDoc MP 4000)和Quantity One软件(Bio-Rad)获取印迹的图像。曝光时间为60秒。
注:在大麦样品中,观察到一个特征明显的44 kDa降解产物(Kokobun等人,2002年)。
注意事项:
不要向试剂溶液中添加任何蛋白质或HRP酶。
可选:用0.2M的磷酸钠二基本溶液在去离子水中洗涤您的管子、微孔板或膜。(初始pH值可能约为9)。通过缓慢添加0.2M的磷酸钠一基本溶液在水中,将pH值降至8.4。
用户指南
将试剂A和B储存在4-8°C的暗处。
在干净的容器中将等体积的试剂A和B(化学发光底物)混合,并在使用前30分钟使其达到室温。
在添加化学发光底物之前,通过使用您协议中的缓冲液(PBS或TBS或TBST-T)清洗您的膜。这将允许在底物接触之前去除任何背景。
底物接触后最多20分钟内可以获得最佳可视化效果。通常,2-5分钟的孵化时间是最佳的。
用滤纸去除多余的底物。
用透明塑料膜或保护膜覆盖印迹,并使用X光胶片或CCD相机曝光。
在某些情况下,Tween可以抑制反应。
为了获得最佳结果,必须使用干净的容器和高质量的水。
此产品的HS编码为:3822.00.0002。
Agrisera 公司提供的植物领域的抗体涵盖拟南芥、莱茵衣藻、蓝藻、松柏类、硅藻、大豆、大麦、蒺藜苜蓿、烟草、稻、菜豆、小立碗藓、杨树、豌豆、番茄、马铃薯、菠菜、小麦、玉米、葡萄等多个物种,此外还有水生生物类(藻类、鱼)抗体,细菌、昆虫、真菌抗体。Agrisera 公司以提供高品质、优服务在欧洲树立了优秀的品牌形象,并成为瑞典 Umeå Plant Science Centre的抗体供货商,同时还积极拓展全球市场,每年都有大批采用该公司抗体产品的高质量研究论文发表于各类学术刊物,受到全球科研工作者的一致认可。作为Agrisera在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的Agrisera产品以及客户订制化服务。
微信扫码在线客服