总胰岛素原ELISA是一种定量免疫测定法,用于测定人血清和血浆(EDTA和肝素)样本中的总胰岛素原(完整胰岛素原、32-33分裂胰岛素原和des 31-32分裂胰岛素原)。仅供研究使用。不用于诊断程序。
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品总胰岛素原ELISA试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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总胰岛素原ELISA试剂盒 | ALP-82-PINHUT-E01 | 查看 |
总胰岛素原ELISA试剂盒测试原理:
总胰岛素原测定是一种双位点夹心免疫测定法,使用一种特定的固相抗体,该抗体固定在微孔板的表面,以及一种用辣根过氧化物酶标记的可溶性抗体。样本与缓冲液共同在微孔板中孵育,经过洗涤步骤后,添加标记抗体溶液。在第二次孵育后,再进行一次洗涤步骤以去除未结合的标记抗体,然后进行测量。通过向每个孔中添加底物来定量固定的酶标记。经过简短的孵育后,通过添加终止溶液来终止反应。在板式阅读器中测量450纳米处的吸光度。
试剂准备、储存和稳定性:
在2-8°C下储存,未开封的试剂将保持活性直至有效期。不要使用超过此日期的试剂。开封后的试剂必须存放在2-8°C。微孔板也必须存放在2-8°C。一旦铝箔袋被打开,应当小心再次紧密封闭。如果按照上述描述储存,已开封的试剂盒保持活性两个月。标准品和对照品:通过添加1毫升去离子水来重悬每个标准品和对照品。让它们静置5分钟,然后轻轻混合以确保所有固体溶解。重悬后的标准品和对照品可以在2-8°C下储存最多两周。HRP结合物:将含有HRP结合物浓缩液(1.0毫升)的全部内容转移到结合物稀释液瓶中(11毫升)(1/12稀释)并彻底混合。1X工作浓度的HRP结合物可以在2-8°C下储存最多两周。洗涤缓冲液:通过将1部分洗涤缓冲液浓缩液与29部分去离子水稀释来准备1X工作浓度的洗涤缓冲液。1X工作浓度的洗涤缓冲液可以在2-8°C下储存最多两周。
样本收集和储存:
血浆或血清样本。不要使用严重溶血的样本。使用新鲜的血浆或样本,并且避免进行超过两次的冻融。储存不当或经过多次冻融的样本可能会产生虚假结果。
样本收集:
血浆:应将全血收集到含有EDTA或肝素抗凝剂的试管中,并在收集后立即离心。分离后应尽快将血浆冷冻并储存在-20°C。
血清:应将全血收集到普通试管中,并让其凝固30分钟。应通过离心分离血块。在操作过程中应注意避免溶血。
样本储存:
在测定前,样本应冷冻储存在-20°C。在测试前,已解冻的样本应多次倒置。
典型标准曲线:
此曲线仅用于说明,不得用于计算结果。
结果计算:
结果可以通过曲线拟合软件(例如4参数或三次样条)自动计算。不同的数据处理函数可能会给出略有不同的结果。样品的浓度可以直接从这个标准曲线上读取。浓度高于最高标准品的样品应该进一步稀释并重新测试。在计算浓度时,必须考虑这个稀释因子。
预期值:
强烈建议每个实验室根据自己的情况确定正常和异常值。
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
作为ALPCO在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。
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