ALPCO-大鼠超敏胰岛素ELISA检测原理和样本处理方案

ALPCO大鼠超敏胰岛素ELISA用于定量测定大鼠血清和血浆中的胰岛素。

该试剂盒设计用于5?L或25?L的样本量。适用于该测定的五个标准品和两个对照品将根据所使用的样本量来确定。

艾美捷大鼠超敏胰岛素ELISA（ALP-80-INSRTU-E01）检测原理：

ALPCO大鼠超敏胰岛素ELISA是一种夹心型免疫测定法。96孔微孔板涂有胰岛素特异性单克隆抗体。将标准品、对照品和样品加入到带有共轭物的微孔板孔中。然后将微孔板在微孔板振荡器上以700-900rpm的速度培养。第一次孵育完成后，用洗涤缓冲液洗涤孔并吸干。加入TMB底物，在微孔板振荡器上以700-900rpm的速度第二次孵育微孔板。一旦第二次孵育完成，加入停止溶液，用分光光度计在450nm处测量光密度（OD）。产生的颜色强度与样品中胰岛素的量成正比。

所需材料

1用于分配5、25、75和100微升的精密移液管（带一次性吸头）

2用于分配75和100微升的重复或多通道移液管

3用于试剂配制的容量瓶和移液管

4用于试剂配制的蒸馏水或去离子水

5微孔板洗涤器或洗涤瓶

6能够以700-900转每分钟速度振荡的微孔板振荡器

7带有450纳米滤光片的微孔板读数器

8用于样本制备的涡旋混合器

注意事项

1. 本试剂盒中包含的人血制品已检测是否含有HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。这些病毒的检测方法不能保证病毒的绝对不存在；因此，所有试剂应被视为潜在传染性物质。处理和处置应符合所有适当的国家和地方法规，以处理潜在的生物危害物质。

2. 所有来自动物源的材料均为BSE（疯牛病）阴性。然而，所有材料应被视为潜在传染性物质。

3. 避免直接接触皮肤。

4. 本产品不得内服。

5. 使用本产品时，避免进食、饮水或吸烟。

6. 不要使用口吸移液管吸取任何试剂。

7. 试剂盒中的试剂是特定批次的，不得替换。

8. 不要使用超过有效期的试剂。

9. 不建议更改测试程序，可能会影响测试结果。

储存条件

试剂盒应储存在2-8°C的环境中。试剂盒在盒标签上的有效期前是稳定的。

样本处理

血清和血浆样本适用于本检测。不需要稀释或处理样本。然而，如果样本的胰岛素浓度高于最高标准，应将样本稀释在零标准中，并重复分析。为了减少潜在的时间相关的样本漂移，建议在使用前彻底涡旋每个样本，并在每次移液操作中不停顿。样本可以在分析前在2-8°C下储存24小时。对于更长时间，建议在<-20°C下储存。避免反复冻融循环。

典型标准曲线：

以下结果仅用于演示目的，不能代替测定获得的数据。每次分析运行和平板测试都必须绘制标准曲线

大鼠超敏胰岛素ELISA文献参考：

Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.