ALPCO 大鼠高范围胰岛素ELISA试剂盒检测原理&程序说明

发布者：艾美捷科技发布时间：2024-09-14

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ALPCO大鼠高量程胰岛素ELISA用于定量测定大鼠血清和血浆中的胰岛素。仅供研究使用。不用于诊断程序。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品大鼠高范围胰岛素ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

产品名称	货号	详情
大鼠高范围胰岛素ELISA试剂盒	ALP-80-INSRTH-E01	查看

大鼠高范围胰岛素ELISA试剂盒检测原理：

ALPCO大鼠高范围胰岛素ELISA是一种夹心型免疫分析法。96孔微孔板被涂覆有特异性针对胰岛素的单克隆抗体。标准品、对照品和样本与结合物一起加入微孔板孔中。然后，微孔板在室温下放置在微孔板振荡器上，以700-900转每分钟的速度振荡。第一次孵育完成后，孔被洗涤缓冲液清洗并吸干。加入TMB底物，然后微孔板再次在室温下以700-900转每分钟的速度振荡。第二次孵育完成后，加入停止液，并通过分光光度计在450纳米处测量光密度（OD）。生成的颜色强度与样本中胰岛素的含量成正比。

所需材料

- 用于分配5、75和100微升的精密移液管（带一次性吸头）

- 用于分配75和100微升的重复或多通道移液管

- 用于试剂配制的容量瓶和移液管

- 用于试剂配制的蒸馏水或去离子水

- 微孔板洗涤器或洗涤瓶

- 能够以700-900转每分钟速度振荡的微孔板振荡器

- 带有450纳米滤光片的微孔板读数器

- 用于样本制备的涡旋混合器

注意事项

1. 本试剂盒中包含的人血制品已检测是否含有HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。这些病毒的检测方法不能保证病毒的绝对不存在；因此，所有试剂应被视为潜在传染性物质。处理和处置应符合所有适当的国家和地方法规，以处理潜在的生物危害物质。

2. 所有来自动物源的材料均为BSE（疯牛病）阴性。然而，所有材料应被视为潜在传染性物质。

3. 避免直接接触皮肤。

4. 本产品不得内服。

5. 使用本产品时，避免进食、饮水或吸烟。

6. 不要使用口吸移液管吸取任何试剂。

7. 试剂盒中的试剂是特定批次的，不得替换。

8. 不要使用超过有效期的试剂。

9. 不建议更改测试程序，可能会影响测试结果。

检测程序

所有试剂和微孔板条应在使用前平衡至室温（18-25°C）。使用前轻轻混合所有试剂。每次检测运行和每次使用多个微孔板时，都必须进行标准曲线的绘制。所有标准品、对照品和样本应以双份运行。

1. 在打开铝箔袋之前，应将微孔板平衡至室温。为标准品、对照品和样本的双份测定指定足够的微孔板条。剩余的微孔板条应存放在含有干燥剂的密封铝箔袋中，温度保持在2-8°C。

2. 将5微升的每种标准品、对照品和样本分别吸入相应的孔中。有关对照品重组的说明，请参见试剂配制和分析证明。

3. 向每个孔中加入75微升的工作浓度结合物（参见试剂配制）。

4. 用板封盖住微孔板，在室温下振荡700-900转每分钟的微孔板振荡器上孵育2小时。

5. 倒掉孔中的内容物，并使用微孔板洗涤器用350微升的工作浓度洗涤缓冲液（参见试剂配制）洗涤微孔板6次。或者，使用带有洗涤喷嘴的洗涤瓶将工作浓度洗涤缓冲液注入孔中。（不建议使用多通道移液管。洗涤缓冲液必须以足够且相等的力量分配，以便正确洗涤孔。）在洗涤之间，丢弃液体，倒置，并在吸水纸上用力拍打微孔板。在最后一次洗涤后（自动或手动），通过倒置并在吸水纸上用力拍打微孔板，去除孔中的任何残留洗涤缓冲液和气泡。

6. 向每个孔中加入100微升的TMB底物。

7. 用板封盖住微孔板，在室温下振荡700-900转每分钟的微孔板振荡器上孵育15分钟。

8. 向每个孔中加入100微升的停止液，并轻轻摇晃微孔板以混合内容物。在进行下一步之前，去除任何气泡。

9. 将微孔板放入能够读取450纳米吸光度的微孔板读数器中。在加入停止液后应立即分析微孔板，且不得超过30分钟。

典型标准曲线：

以下结果仅用于演示目的，不能代替测定获得的数据。每次分析运行和平板测试都必须绘制标准曲线。