ALPCO小鼠超灵敏胰岛素ELISA试剂盒(10板)检测原理&结果计算方案

小鼠超灵敏胰岛素ELISA定量检测小鼠I和小鼠II前胰岛素基因中的胰岛素蛋白产物，样本量仅需5 uL的血清或血浆。仅供研究使用，不得用于诊断程序。

对于尾部切片：

仅需5 uL样本；

动态范围为0.18-6.9 ng/mL；

灵敏度达到0.115 ng/mL。

对于低胰岛素样本：

仅需25 uL样本；

动态范围为0.025-1.25 ng/mL；

灵敏度达到0.019 ng/mL。

ALPCO 小鼠超灵敏胰岛素ELISA试剂盒(10板)货号：ALP-80-INSMSU-E10 的检测原理：

ALPCO小鼠超灵敏胰岛素ELISA是一种夹心型免疫测定。96孔微孔板上涂有特异性针对胰岛素的单克隆抗体。标准品、对照品和样本与标记物一起添加到微孔板孔中。随后，微孔板在微孔板摇床上以700-900 rpm的速度进行第一次孵育。第一次孵育完成后，使用洗涤缓冲液对孔进行洗涤并吸干。接着加入TMB底物，再次在微孔板摇床上以700-900 rpm的速度进行第二次孵育。一旦第二次孵育完成，加入终止溶液，然后使用分光光度计在450 nm处测量光密度（OD）。生成的颜色强度与样本中胰岛素的含量成正比。

所需材料：

精密移液器（用于分配5、25、75和100 uL，配有一次性吸头）

重复移液器或多通道移液器（用于分配75和100 uL）

用于试剂制备的量筒和移液器

蒸馏水或去离子水（用于试剂制备）

微孔板洗板机或洗瓶

能达到700-900 rpm的微孔板振荡器

配有450 nm滤光片的微孔板读数仪

样本准备用的涡旋仪

注意事项：

本试剂盒中使用的人的血液产品已经经过HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的检测。检测方法不能保证病毒的完全不存在，因此所有试剂都应视为潜在的感染性物质。操作和废弃物处理应符合所有相关的国家和地方对潜在生物危害物质的处理规定。

所有来自动物来源的材料均为BSE阴性。然而，所有材料应避免接触反刍动物。

避免直接接触皮肤。

本产品仅限外部使用。

使用本产品时避免进食、饮水或吸烟。

禁止用嘴吸取任何试剂。

本试剂盒中的试剂为特定批号，不能替代使用。

请勿使用过期试剂。

不建议对测试程序进行任何修改，修改可能会影响测试结果。

试剂制备：

所有试剂在制备和后续使用之前必须先回温至室温。

结合物储备液需要与10倍的结合物缓冲液稀释。例如，为了制备足够的工作浓度结合物以完成一个微孔板，需将0.9 mL的结合物储备液（11X）与9 mL的结合物缓冲液稀释。

洗涤缓冲液浓缩液需要与20倍的蒸馏水稀释。例如，为了制备工作浓度的洗涤缓冲液，需将20 mL洗涤缓冲液浓缩液（21X）与400 mL去离子水稀释。工作浓度的洗涤缓冲液在室温下（18-25°C）稳定保存4周。

对照品（等级1、2、3）以冻干形式提供。请参阅随每个试剂盒提供的分析证书，获取适当的去离子水量进行复溶。复溶时，关闭瓶口，轻轻摇匀瓶子，静置30分钟后使用。瓶中的内容物应为溶液状态且无可见颗粒。复溶后的对照品在2-8°C下稳定保存7天。如果需要，可以将其分装后存放在≤ -20°C下，保存时间最长可达6个月。对照品不应反复冻融。

结果计算

从标准品构建标准曲线，将零标准作为曲线的一部分。建议使用软件程序计算标准曲线并确定样品的浓度。推荐使用五参数曲线进行数据分析。

ALPCO小鼠超灵敏胰岛素ELISA是一种配体结合检测，响应与分析物浓度之间呈S形关系。目前公认的此类曲线参考模型使用五参数逻辑（pl）拟合，因为这些模型在更大范围内优化了准确性和精确性。虽然立方样条曲线和其他模型也是可接受的方法，但它们通常在浓度范围的低端和高端显示较低的实验内准确性和精确性。

在下面的示例中，使用了五参数逻辑曲线拟合，以最大化低浓度样品的准确性和精确性。然而，由于个别实验室条件的影响，所有模型在可检测范围的最低和最高端的准确性和精确性都受到限制。因此，在解释分析物响应变得非线性时，应始终谨慎。

不建议推测样品浓度值超出标准浓度值的范围。

典型标准曲线

以下结果仅供演示使用，不能替代通过检测获得的数据。每次检测和测试的板上都必须进行标准曲线的测定。

ALPCO公司从成立初期就致力于生物医药领域各种免疫检测试剂盒的研发与生产，力求为广大客户提供高质量的免疫检测产品。ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、 内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。艾美捷科技是ALPCO的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。