ALPCO-超灵敏胰岛素ELISA，高精度定量测定人血清和血浆中的胰岛素

ALPCO超敏胰岛素ELISA用于定量测定人血清和血浆中的胰岛素。

艾美捷超灵敏胰岛素ELISA（ALP-80-INSHUU-E01.1）检测原理：

ALPCO超敏胰岛素ELISA是一种夹心型免疫分析法。96孔微孔板被涂覆有特异性针对胰岛素的单克隆抗体。标准品、样本和对照品与检测抗体一起加入微孔板孔中。然后，微孔板在室温下放置在微孔板振荡器上，以700-900转每分钟的速度振荡。第一次孵育完成后，孔被洗涤缓冲液清洗并吸干。加入TMB底物，然后微孔板再次在室温下以700-900转每分钟的速度振荡。第二次孵育完成后，加入停止液，并通过分光光度计在450纳米处测量光密度（OD）。生成的颜色强度与样本中胰岛素的含量成正比。

注意事项

1. 本试剂盒中包含的人血制品已检测是否含有HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。这些病毒的检测方法不能保证病毒的绝对不存在；因此，所有试剂应被视为潜在传染性物质。处理和处置应符合所有适当的国家和地方法规，以处理潜在的生物危害物质。

2. 所有来自动物源的材料均为BSE（疯牛病）阴性。然而，所有材料应被视为潜在传染性物质。

3. 避免直接接触皮肤。

4. 本产品不得内服。

5. 使用本产品时，避免进食、饮水或吸烟。

6. 不要使用口吸移液管吸取任何试剂。

7. 试剂盒中的试剂是特定批次的，不得替换。

8. 不要使用超过有效期的试剂。

9. 不建议更改测试程序，可能会影响测试结果。

试剂准备

所有试剂在使用前必须平衡至室温。洗涤缓冲液浓缩液需用20份蒸馏水稀释。例如，要准备工作强度洗涤缓冲液，用400毫升去离子水稀释20毫升洗涤缓冲液浓缩液（21倍）。工作强度洗涤缓冲液在室温（18-25°C）下稳定4周。

糖尿病控制（1级）以冻干形式提供。请参考每个试剂盒附带的分析证明，以获取重悬的适当体积的去离子水。用橡胶塞和瓶盖封闭小瓶，轻轻摇晃小瓶，并在使用前让其静置30分钟。小瓶中的内容物应完全溶解，无可见颗粒。重悬的对照品在2-8°C下储存1天是稳定的。如果需要，对照品可以分装后在-20°C下储存长达6个月。对照品不应反复冻融。

超灵敏胰岛素ELISA结果计算

根据标准品构建标准曲线。零标准品应作为空白，其平均值应从每个孔中减去。建议使用软件程序来计算标准曲线并确定样本的浓度。ALPCO超敏胰岛素ELISA是一种配体结合测定，其响应与分析物浓度呈S形关系。目前接受的此类曲线的参考模型使用4或5参数逻辑（pl）拟合，因为这些模型在更大范围内优化了准确性和精确性。尽管三次样条和其他模型是可接受的方法，但它们通常在范围的低端和高端显示出较低的内部检测准确性和精确性。

在以下示例中，使用了5参数逻辑曲线拟合来最大化低浓度样本的准确性和精确性。然而，由于个别实验室条件的影响，所有模型在可检测范围的最低端和最高端的准确性和精确性都是有限的。因此，在解释分析物响应变得非线性的结果时，应始终谨慎。

典型标准曲线：

以下结果仅用于演示目的，不能代替测定获得的数据。每次分析运行和平板测试都必须绘制标准曲线

预期值

ALPCO超敏胰岛素ELISA是参照世界卫生组织胰岛素第一国际参考制剂（IRP）66/304进行校准的。先前的研究确定正常的胰岛素范围为5 – 25 ?IU/mL。建议每个实验室为各自的患者群体建立自己的正常范围。

单位换算

将人胰岛素从国际单位（IU）转换为克的换算关系为：1 IU人胰岛素 = 6 nmol = 34.8 ?g胰岛素。