ALPCO活性GLP-1(7-36)酰胺化学发光ELISA试剂盒样本处理方案

ALPCO活性GLP-1（7-36）酰胺化学发光ELISA用于定量测定人、小鼠和大鼠EDTA血浆中的活性胰高血糖素样肽-1（GLP-1）（7-26）酰胺。仅供研究使用。不用于诊断程序。

艾美捷活性GLP-1(7-36)酰胺化学发光ELISA试剂盒（ALP-80-GLP1A-CH01）检测原理：

ALPCO STELLUX?活性GLP-1 (7-36)酰胺化学发光酶联免疫吸附测定（ELISA）是一种夹心型测定法。96孔微孔板涂有针对活性GLP-1 (7-36)酰胺N端的单克隆抗体。标准品、对照品和样本被加入到含有测定缓冲液的微孔板孔中。然后，微孔板在室温下放置在微孔板振荡器上，以700-900转每分钟的速度振荡孵育。第一次孵育完成后，孔被洗涤缓冲液清洗并吸干。然后加入检测抗体，微孔板再次在设定为700-900转每分钟的微孔板振荡器上孵育。检测抗体孵育后，板被洗涤，每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）结合的链霉亲和素（SA）。板在室温下在设定为700-900转每分钟的板振荡器上孵育，洗涤并吸干。加入化学发光底物，微孔板在2分钟后使用化学发光板读取器读取。产生的光强度与样本中活性GLP-1 (7-36)酰胺的含量成正比。

供应的材料：

Component Quantity Preparation

Active GLP-1 Microplate (96 wells) 12x8 strips Ready to use

"Standards (A-F,Zero)*

(500,120,30,10,4.0,1.5,and O pg/mL)" 1 vial each Lyophilized*

Control Levels 1,2 and 3* 1 vial each Lyophilized*

Assay Buffer 10mL Ready to use

DetectorAntibody 1 vial each Lyophilized*

Detector Antibody Buffer 14 mL Ready to use

Streptavidin-HRP 30μL 501X

Streptavidin-HRP Buffer 12 mL Ready to use

Wash Buffer Concentrate 100 mL 21X

Substrate A 6mL Ready to use

Substrate B 6 mL Ready to use

Plate Sealers 3 Ready to use

*请参阅每个试剂盒随附的分析证书，了解批次特定信息、标准浓度、控制范围和复溶量

所需材料：

用于分配高达1000 μL的精密移液管（带一次性吸头）

用于分配高达100 μL的可重复使用或多通道移液器

用于试剂准备的量筒和移液管

用于试剂准备的蒸馏水/去离子水

微孔板洗涤器或洗涤瓶

注意事项

1. 此试剂盒中包含的人血液制品已检测HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的存在。这些病毒的检测方法不能保证病毒的完全不存在；因此，所有试剂应被视为潜在的传染性物质。处理和处置应遵循所有适当的国家和地方法规，以处理潜在的生物危害材料。

2. 所有来自动物来源的材料均为牛海绵状脑病（BSE）阴性。然而，所有材料应被视为潜在的传染性物质。

3. 避免直接与皮肤接触。

4. 本产品不可内服。

5. 使用本产品时，避免进食、饮水或吸烟。

6. 不要用嘴吸取任何试剂。

7. 此试剂盒中的试剂是特定批次的，不得替换。

8. 不要使用超过有效期的试剂。

9. 不建议更改测试程序，可能会影响测试结果。

活性GLP-1(7-36)酰胺化学发光ELISA试剂盒样本处理：

人、小鼠和大鼠的EDTA血浆适用于此测定。应使用BD? P800血液收集和保存系统进行样本收集，该系统含有DPP-IV抑制剂和其他蛋白酶抑制剂混合物（产品编号366420）。或者，可以将全血收集到含有EDTA的冰镇玻璃管中，预先根据制造商的说明加入适量的DPP-IV抑制剂（EMD Millipore Cat #DPP4）和抑蛋白酶。混合后将管子存放在冰浴中。立即以1,000 xg离心管子10分钟，或将管子放在冰上并在一小时内离心。如果样本将在收集后2小时内检测，可以将样本保存在冰上。对于更长时间的储存，应将样本分装后存放在≤ -70°C。避免多次（>3次）冻融循环。样本解冻后，在进行测定前将样本保持在冰上。建议在将样本加载到板上之前，先将所有样本在2 - 8°C下以3,000 xg离心10分钟。含有生物素、溶血、黄疸或脂血的样本在测定中未显示出干扰。然而，建议避免使用明显溶血或脂血的样本。

典型标准曲线：

以下结果仅用于演示目的，不能代替通过测定获得的数据。每次测定都必须运行带有对照的标准曲线。数据分析采用1/y2加权的A5参数曲线拟合。

文献参考：

Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.