ALPCO GLP-1(7-36和9-36)ELISA, 96孔，专为血浆样本定量分析设计

该ELISA（酶联免疫吸附试验）试剂盒用于定量测定血浆样本中胰高血糖素样肽-1（7-36）[GLP-1（7—36）]和（9—36）[GLP1（9—36]的总值。GLP-1肽的一级氨基酸序列在哺乳动物物种中是相同的，即大鼠、小鼠、猪、人等。该试剂盒仅用于研究目的

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品GLP-1(7-36和9-36)ELISA, 96孔。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

GLP-1(7-36和9-36)ELISA, 96孔检测原理：

ALPCO STELLUX? C肽化学发光酶联免疫吸附试验是一种夹心类型的免疫测定法。96孔微孔板被涂覆有特异性针对C肽的单克隆抗体。标准品、对照品和样本被添加到微孔板孔中，同时加入检测缓冲液。然后，微孔板在室温下放置在微孔板振荡器上，以700-900转每分钟的速度振荡。第一次孵育完成后，孔被洗涤缓冲液清洗并吸干。然后添加检测抗体，微孔板再次在微孔板振荡器上以700-900转每分钟的速度孵育，之后进行清洗和吸干。接着向孔中添加链霉亲和素-辣根过氧化物酶，进行第三次孵育，同样在室温下以700-900转每分钟的速度振荡，然后清洗并吸干。加入化学发光底物，并通过化学发光板读数器在一分钟内读取微孔板。产生的光强度与样本中C肽的含量成正比。

样本收集

1. 在样本收集前，无需对个体进行特殊准备。然而，空腹样本和非空腹/葡萄糖诱导样本可能会显著影响总GLP-1水平。

2. 至少在样本收集前48小时内，不应从服用含有生物素的多种维生素或饮食补充剂的供体中采集样本。

3. 可以使用BD? P700血液收集和保存系统（含有DPP-4蛋白酶抑制剂混合物）和紫色顶盖的Vacutainer? EDTA-血浆管进行样本收集。

4. 如果使用Vacutainer? EDTA-血浆管进行样本收集，建议（但非必要）在收集后立即向收集的EDTA全血中加入适量的DPP-4抑制剂。请参阅DPP-4抑制剂制造商的说明。倒转管子混合均匀，并将管子放置在冰浴中。在冷藏离心机中以1000 g离心10分钟。注意：由于强烈建议使用DPP-4抑制剂的样本来测量活性GLP-1 (7-36)，如果同一样本将用于活性GLP-1 (7-36)和总GLP-1的测量，则应在样本收集中包含DPP-4抑制剂。

5. 如果在收集后3小时内进行测试，血浆样本应存放在2-8°C。对于更长时间的存储，建议将血浆样本存放在-70°C。如有必要，可在冷冻前分装样本。

结果解释

1. 计算每对重复测试结果的平均吸光度。

2. 从所有其他读数的平均吸光度中减去STD 1（0 ng/mL）的平均吸光度，以获得校正吸光度。

3. 通过使用点对点或对数-对数纸，将所有标准水平的校正吸光度（纵坐标）与标准浓度（横坐标）相对应，生成标准曲线。也可以使用适当的计算机辅助数据缩减程序来计算结果。我们建议使用点对点或二次曲线拟合。使用各自的校正吸光度直接从标准曲线上读取对照品和测试样本的GLP-1 (7-36)浓度。

本酶联免疫吸附试验（ELISA）的设计、开发和生产旨在定量测量血浆样本中的GLP-1（7-36）和（9-36）。该试验采用双位点“夹心”技术，使用两种选定的GLP-1抗体。本试验使用与活性GLP-1（7-36）ELISA（产品编号43-GP1HU-E01）相同的校准品和示踪抗体。

试验标准品、对照品和测试样本直接添加到涂有链霉亲和素的微孔板孔中。随后，向每个孔中添加生物素标记的GLP-1特异性抗体和辣根过氧化物酶（HRP）偶联的GLP-1特异性抗体的混合物。在第一次孵育期后，形成“链霉亲和素-生物素抗体-GLP1(7-36)/(9-36)-HRP偶联抗体”的“夹心”免疫复合物，并附着在板壁上。在随后的洗涤步骤中去除未结合的HRP偶联抗体。

为了检测这个免疫复合物，每个孔随后与底物溶液孵育一段时间的反应，并在分光光度计微孔板读数器中进行测量。微孔板孔壁上与GLP-1（7-36）/（9-36）结合的免疫复合物的酶活性与样本中总GLP-1的含量成正比。

文献参考：

1. Levy JC. Therapeutic intervention in the GLP-1 pathway in Type 2 diabetes. Diabet Med.2006 Mar;23 Suppl 1:14-9.

2. Mannucci E, Ognibene A, Cremasco F, Bardini G, Mencucci A, Pierazzuoli E, Ciani S,Fanelli A, Messeri G, Rotella CM. Glucagon-like peptide (GLP)-1 and leptin concentrationsin obese patients with Type 2 diabetes mellitus. Diabet Med. 2000 Oct;17(10):713-9.

3. Nauck MA, Weber I, Bach I, Richter S, Orskov C, Holst JJ, Schmiegel W. Normalizationof fasting glycaemia by intravenous GLP-1 ([7-36 amide] or [7-37]) in type 2 diabeticpatients. Diabet Med. 1998 Nov;15(11):937-45.

4. Byrne MM, G?ke B. Human studies with glucagon-like-peptide-1: potential of the guthormone for clinical use.

5. Mannucci E, Tesi F, Bardini G, Ognibene A, Petracca MG, Ciani S, Pezzatini A, Brogi M,Dicembrini I, Cremasco F, Messeri G, Rotella CM. Effects of metformin on glucagon-likepeptide-1 levels in obese patients with and without Type 2 diabetes. Diabetes Nutr Metab.2004 Dec;17(6):336-42. 

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。