ALPCO-大鼠前白蛋白ELISA，提供快速、准确的实验结果

ALPCO-大鼠前白蛋白ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于测定大鼠血清和血浆样本中的前白蛋白。仅供研究使用。不用于诊断程序。

艾美捷大鼠前白蛋白ELISA（ALP-41-PALRT-E01）检测原理：

在这种检测中，样本中存在的前白蛋白与已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗前白蛋白抗体发生反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后，添加与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗前白蛋白抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的前白蛋白形成复合物。在另一个洗涤步骤之后，通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB），对结合的酶进行检测。结合的酶量与被测试样本中前白蛋白的浓度直接相关；因此，450纳米处的吸光度是测试样本中前白蛋白浓度的量度。测试样本中的前白蛋白量可以从标准品构建的标准曲线中插值得出，并根据样本稀释进行校正。

样本收集和处理：

所有血液成分和生物材料应视为潜在危险。在处理和处置时遵循通用预防措施。如果血液样本出现凝血、严重溶血、脂血，或对样本的完整性有疑虑，请做记录并谨慎解释结果。下面列出的样本收集和储存条件是作为一般指导。尚未评估样本的稳定性。

1血清样本 - 应通过静脉穿刺收集血液。血液凝固后，应通过离心分离血清。取出血清并立即检测或分装样本并储存在-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融循环。

2血浆样本 - 应将血液收集到含有抗凝剂的容器中，然后进行离心。立即检测或分装样本并储存在-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融循环。

3已知干扰物质 - 浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

试剂准备：

在使用前，将所有试剂平衡至室温（16°C至25°C）。

1稀释液浓缩液 - 提供的稀释液是5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩液，4份dH2O）按1:5稀释。

2洗涤液浓缩液 - 提供的洗涤液是20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩液，19份dH2O）按1:20稀释。在储存温度较低时，浓缩液中出现结晶并不罕见。在稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解晶体。

3酶-抗体结合物 - 为每个微孔板测试条计算所需的工作结合物溶液量，为每个用于测试的测试条添加10微升酶-抗体结合物至990微升1X稀释液中。均匀但轻柔地混合，避免产生泡沫。

4大鼠前白蛋白ELISA微孔板 - 按提供的状态准备使用。打开铝箔袋，从袋中取出微孔板。取出在检测中不会使用的所有条和孔，放回袋中并重新密封，连同干燥剂一起放回。

5大鼠前白蛋白校准品 - 根据特定批次的分析证明书进行准备。

结果计算：

1. 从所有孔的值中减去平均背景值（标准零的平均吸光度读数）。

2. 对每个标准的平均重复读数取平均值，并使用这些结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来减少数据，构建标准曲线。也可以使用二阶多项式（二次）或其他曲线拟合；然而，它们对数据的拟合将不够精确。

3. 从标准曲线中插值样本值。根据稀释因子进行校正，以得出原始样本中的前白蛋白浓度。

附录A - 参考血清信息：

此试剂盒中包含一瓶参考血清。请参阅随附的产品概况表以获取特定批次的信息。请注意以下几点：

1. 收到参考血清后应立即冷冻。如果储存得当，它在有效期前都是稳定的。

2. 应适当稀释参考血清，以适应标准范围曲线。有关说明，请参考协议中的“样本稀释”部分。

3. 在移液样本（程序部分）时，也应以双份移液参考血清。